SCF对HUVECs增殖、迁移、管状形成功能影响和对EPCs的趋化作用

发布时间：2020-03-13 18:52

【摘要】： 目的:SCF也称c-Kit配体(KL或c-Kit-L)、MGF及SLF,其受体c-Kit可表达于内皮细胞和内皮祖细胞上,我们通过观察SCF对HUVECs增殖、迁移、管状形成功能的影响和对EPCs的趋化作用,探讨SCF是否在血管新生、血管发生中发挥生物学活性。 方法:用0.1%Ⅰ型胶原酶消化分离HUVECs;首先设置空白对照、SCF、VEGF、Anti-SCF、IgG共5组,然后用MTT法、CCK-8法,细胞划痕法,Matrigel体外三维成型法分别检测SCF是否具有提高内皮细胞的增殖、迁移和管状形成能力的生物学活性。用流式细胞仪分选脐血中CD133~+细胞(EPCs);并应用transwell技术(设为5组,同前)检测SCF对EPCs是否具有趋化作用。 结果:①0.1%Ⅰ型胶原酶消化15min为最佳分离HUVECs的方法;②SCF无促进HUVECs增殖能力的作用,与空白对照组的100±3.1%(MTT)100±1.9%(CCK-8)相比,SCF组(100ng/ml)的增殖百分率为99±4.4%(MTT)101±2.3%(CCK-8),差异无统计学意义(P＞0.05);③SCF具有显著提高HUVECs迁移能力的作用;④SCF具有提高HUVECs管状形成能力的作用,并呈剂量依赖性,100ng/ml SCF为最佳浓度,完整小管形成数量达30±3.4个,明显高于空白对照组的5±2.6个,差异具有统计学意义(P＜0.05)。⑤流式细胞仪分选标记有CD133荧光抗体的脐血单个核细胞可成功获得EPCs;⑥SCF对EPCs具有显著趋化作用,与空白对照组的47±4.7个相对照,SCF组跨膜迁移细胞数高达118±6.5个,差异具有统计学意义(P＜0.05)。 结论:SCF具有提高HUVECs迁移、管状形成能力的生物学活性,并对EPCs有趋化作用。SCF/c-Kit信号转导在内皮细胞和EPCs参与的血管新生、血管发生中可能发挥重要作用。
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R329

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本文编号：2586803