脂联素对骨关节炎滑膜细胞及软骨干细胞作用的研究

发布时间：2020-03-27 20:35

【摘要】：目的：分析脂联素受体在关节炎滑膜细胞中的表达情况,研究脂联素对滑膜细胞PGE2产生的影响及其机制；从晚期骨关节炎患者关节软骨中分离出软骨干细胞,对其“干性”进行验证；探讨脂联素对软骨干细胞成软骨能力的影响。 方法：分别从基因和蛋白水平比较脂联素受体(Adipo R)在骨关节炎(OA)和类风湿性关节炎(RA)滑膜细胞中的表达差异,探讨脂联素对滑膜细胞PGE2产生的影响,并对其机制做初步的研究；采用CD146标记,流式细胞分选的方法从晚期骨关节炎关节软骨中分离出软骨干细胞,对其克隆形成能力,表面分子,成骨、成脂、成软骨能力进行检测,并和脂肪干细胞的分化能力进行对比,最后在体外诱导软骨干细胞成软骨分化时用脂联素进行干预,观察脂联素对软骨干细胞成软骨分化能力的影响。 结果：脂联素受体Adipo Rl和Adipo R2在OA和RA滑膜细胞中均有表达,且AdipoR1在RA滑膜细胞中的表达要明显强于OA,而Adipo R2在两种细胞间的表达无明显差异。当给予脂联素刺激时,OA和RA滑膜细胞均能产生大量PGE2,且RA滑膜细胞PGE2产生的量要明显高于OA滑膜细胞；当给予两种细胞Adipo Rl基因敲除后,RA滑膜细胞和OA滑膜细胞PGE2的释放量无明显差异,当敲除Adipo R2后,RA滑膜细胞PGE2的释放量仍明显高于OA滑膜细胞。当脂联素刺激OA滑膜细胞时,可以发现PGE2合成相关基因COX-2、mPGES-1表达量上调,且非甾体抗炎药和COX-2抑制剂能够抑制脂联素诱导的OA滑膜细胞PGE2的释放。从OA关节软骨中分离出的软骨干细胞,其表面表达有与其他类型间充质干细胞相似的表面分子,有较高的克隆形成能力,并能成功的向脂肪、骨、软骨细胞进行诱导分化；和脂肪干细胞相比,软骨干细胞具有较强的成软骨能力,但成骨和成脂肪能力不如脂肪干细胞。在成软骨诱导过程中,当加有脂联素时,会减弱软骨干细胞的成软骨分化能力。 结论：脂联素能促进关节炎滑膜细胞PGE2的释放,且Adipo R1在炎性反应中起着更为重要的作用。退变关节软骨中存在有软骨干细胞,且脂联素能抑制软骨干细胞的成软骨分化能力,说明脂联素除了能在成熟细胞水平促进OA的发展,还能在干细胞水平干预干细胞参与的组织修复。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363

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本文编号：2603357