静磁场对大鼠成骨细胞及其牙周炎组织影响的研究

发布时间：2020-05-01 12:49

【摘要】：目的 随着生物磁技术的迅猛发展,磁治疗在医学中的基础和临床应用研究越来越受到关注,但是有关静磁场对牙周炎组织生物效应的研究未见报道。 成骨细胞是保持骨形态结构和性能的最小结构和功能单位,作为骨组织的重要功能细胞,在骨的形成过程中起着关键作用。成骨细胞的增殖、骨基质的分泌和钙盐沉积对骨的形成、重建和修复具有重要意义。 本实验通过建立体外培养大鼠颅骨成骨细胞实验模型,排除了体内复杂的生物环境因素的影响,观察不同剂量的静磁场对体外培养的成骨细胞生长的直接效应,专一的分析研究静磁场刺激对成骨细胞的生长和功能变化的影响;建立牙周炎动物实验模型,研究静磁场对牙周膜组织结构、功能的影响。从细胞水平和分子水平探讨静磁场对骨生长的作用机制,为临床选择合适的磁场参数,科学的利用磁场疗法,提供实验依据。 方法 1 静磁场的设计 将钕铁硼永磁体充磁后固定于特制的长方形槽内,其上方可以放置各种细胞培养板,调节槽装置的高度,使培养板底部的磁场强度分别为0Gs、400Gs、620Gs、830Gs、1080Gs。 2 大鼠颅骨成骨细胞的分离、培养 无菌操作下取出Wistar乳鼠头盖骨,刮去骨膜和软组织,经0.25%胰酶和1mg/mlⅡ型胶原酶消化后,应用差速黏附法分离成纤维细胞,置于37℃、5%CO_2饱和湿度的培养箱中培养,3天换液,待细胞长满平底后传代,备用。 3 成骨细胞的增殖活性测定 成骨细胞接种于96孔培养板内培养24h,将各培养板分别放入不同强度磁场中,继续培养24h、48h、72h。在每时间点应用MTT法,测定490nm
【图文】：

1为磁体的位置(A)和磁场强度(B)平面骨成骨细胞体外培养的建立细胞的分离、培养川天的Wsiart乳鼠5只，投人75%酒精头盖骨，刮去骨膜和软组织，用D一巧分钟，弃去消化液，加入lm州耐钟、5分钟离心骨片和细胞，弃上清液反复吹打骨片和细胞，将细胞悬液纤维细胞后，置于37℃、5%CO:饱和长满平底后传代，备用。细胞的I型胶原免疫组化染色法。细胞以1x105/血接种于预置小养72小时。取出盖玻片，PBS冲洗，，，

经酶消化分离大鼠颅骨的骨片后，镜下可见大量的悬浮细胞。经差速薪附法分离的成骨细胞培养2h4后，，可见细胞呈梭形、三角形、多角形等散在贴壁生长，见图l一。d7左右细胞基本融合，长满培养瓶底，见图1一3。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R35;R781.4

【参考文献】

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本文编号：2646663