活化蛋白C对脂多糖诱导内皮细胞活化的影响

发布时间：2020-05-06 11:53

【摘要】：目的：采用LPS刺激的人脐带内皮细胞模型，观察APC对炎症反应及凝血纤溶反应的影响。方法：用胶原酶灌洗消化方法，分离人脐带内皮细胞，细胞传至第二代后分组：SFM对照组、PBS对照组、LPS组(1μg／ml)、APC组(7μg／ml)、PRE-APC组(APC处理30分钟后加入LPS)和POST-APC组(LPS诱导内皮细胞30分钟后加入APC)。分别于加入LPS即刻，加入LPS后4hr、8hr、12hr及24hr采集细胞培养上清液，ELISA方法测定t-PA、PAI-1、IL-6和IL-8浓度。于LPS刺激后24小时收集细胞并提取RNA。RT-PCR方法检测各组各个时间点相应细胞因子、纤溶反应因子、TF、EPCR以及TM mRNA的变化，并进行半定量分析。结果： 1．人脐带内皮细胞受到LPS刺激后，t-PA水平较对照组明显降低，至24小时仍呈下降趋势。用APC处理LPS诱导的内皮细胞后，可使t-PA表达回升，同样具有时相关系。t-PA的mRNA变化与蛋白质的表达相同。 LPS刺激后，PAI-1水平自4小时开始升高，至24小时仍呈上升趋势，较对照组明显升高；用APC处理LPS诱导的内皮细胞后PAI-1的水平下降，同样具有时间依赖关系。PAI-1 mRNA变化与蛋白质变化相同。 2．人脐带内皮细胞受LPS诱导后，，TM、EPCR mRNA表达下降。TF mRNA表达升高；用APC处理后，可使TM、EPCR mRNA表达回升，TF mRNA表达进一步升高。 3．人脐带内皮细胞受到LPS刺激后，细胞因子IL-6、IL-8较SFM对照组及PBS对照组明显升高，于4小时开始，至24小时仍呈上升趋势。用APC处理LPS诱导的内皮细胞后，可使IL-6、IL-8水平进一步升高。IL-6、IL-8 mRNA的变化与蛋白质相同。
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R363

【参考文献】