大鼠穹窿下器参与脑内神经免疫调节的形态学研究

发布时间：2020-05-10 18:51

【摘要】： 穹窿下器(subfomical organ，SFO)位于第三脑室顶部，其背侧紧邻腹侧海马连合，其腹侧邻近室间孔。在正中矢状切面上，SFO呈长梭形，其中间部(体部)最宽大，前腹侧端(腹侧柄)和背后端(背侧柄)较窄细。在冠状面上，SFO二柄部呈盘状，体部近于半球形。在光镜下观察，其脑室面为室管膜单层柱状上皮，其中以单纤毛的伸展细胞居多；其实质部富含微血管，在其间有密集的各种细胞，，以神经内分泌样神经元最多，其次含胶质细胞和神经纤维。在电镜下观察，穹窿下器的毛细血管为窗性毛细血管，内皮缺乏紧密连接结构，基膜薄而不完整，内皮与基膜之间的间隙宽大，内皮裂隙可通向此间隙，毛细血管内皮腔面可见贴壁小泡，星形胶质细胞脚板未完整包围毛细血管，这些结构特点提示SFO的血脑屏障不完整。因此它是典型的室周器官(circumventricular organs，CVOs)之一，Gross等人还将穹窿下器、终板血管器和最后区等称为感受性室周器官(sensory CVOs，SCVOs)，认为它们可能作为脑的窗口(windows of the brain)能感受血携免疫信息分子的信息变化。已经证实SFO与心血管活动的调节、饮水行为，以及神经内分泌等多种生理功能有着密切的关系，它在体内环境稳定机制中起着重要调节作用。早就有文献指出，CVOs参与脑内免疫反应，但无详细报道。脑屏障留有CVOs和柔膜(珠网膜和软脑膜)缺乏血脑屏障的“脑开窗”，但脑内理化环境仍能保持相对稳定，这是个尚未解开之谜。脑有免疫系统，但脑是免疫相对豁免器官，又是一个未解之谜。本研究欲以SFO为CVOs的代表，以形态学手段，探求其在感受血携免疫信息分子和感受脑脊液化学分子方面，及对脑内免疫反应调节方面的意义。我们认为从其形态学的诸多特点上来推测，穹窿下器肯定与脑内的神经免疫调节有着一定的联系。也有一些研究表明穹窿下器等感受性室周器官在对某些诸如：IL-1、TNF等细胞因子的通过方面有着特中文摘要别的表现，这也增强了我们研究的可厅性。为了证实穹窿下器在脑内免疫调节系统中的作用，在本研究当中，应用了NADPH刁的组化方法、TUNEL末端标记法、扫描及透射电镜方法、免疫组织化学的荧光双标法及激光扫描共聚焦显微镜技术，来研究在腹腔内给予大肠杆菌内毒素后，脑内的一氧化氮合酶细胞的变化、室管膜细胞的凋亡、早期即刻基因（immediate early genes沁－fos的表达与星形胶质细胞之间的关系，以及穹窿下器与其它脑区相比较时的特异性改变。并通过不同时间点的选择，来推断穹窿下器在整个脑的变化中所处的阶段性作用。大肠杆菌内毒素是由革兰氏阴性细菌外膜产生的一种复合脂多糖，外周给予内毒素后可以引起机体的许多急性反应，包括高热、痛阈降低、加速新陈代谢等，并激活神经系统的多种内分泌活动，可以显著地增加血浆中多种激素的水平。即大大的激发了机体的免疫应激状态。在此状态下的穹窿下器又有着什么样的形态学上的变化呢。一氧化氮与炎症及自身免疫反应有着密切的联系，对各种白细胞介素的分泌起着复杂的影响作用，可促进 IL刁 a和 IL八的产生，抑制巨噬细胞及肝巨噬细胞产生IL6，NO被认为是一种新的免疫介质。因此，我们用能催化产生一氧化氮的一氧化氮合酶细胞作为指标，来观察其在不同免疫状态下的大鼠脑内的变化，以推测它们在脑内免疫反应中的作用。在本实验中，我们通过腹腔内给予不同剂量的大肠杆菌内毒素（内；：1．smwg、内厂2．sing 各内厂3．sin叭g）和地塞米松（地；：6mg／kg、地。：12mghg、地。：18mgdig）8小时后，观察阳性一氧化氮合酶细胞与它们的剂量依赖关系，进而证实一氧化氮合酶细胞在不同的免疫状态下的不同变化，正是一氧化氮参与脑内免疫调节的重要证据。结果显示在不同组别中穹窿下器的阳性一氧化氮合酶细胞的数量有着明显的差异，应用体视学测量方法，计算出不同组别的穹窿下器内一氧化氮合酶阳性细胞的面密度均值和标准差，并进行在检验得出：对照组＜地1＜地广地广内；＜内产内尸同样，在对相同组别的脑的不同部位进行面密度比较时，穹窿下器内的阳性一氧化氮合酶细胞均有着明显的增高。基于一氧化氮合酶阳性细胞在穹窿下器内特别的表现，我们认为 2 中文摘要有必要从电镜水平来观察穹窿下器此时在形态学上的改变。而对于穹窿下器血脑屏障方面的研究较多而详细，但从脑一脑脊液屏障方面的研究并不十分透彻，尤其是穹窿下器与周围脑结构的差别以及其在免疫状态发生改变后的形态，并未引起注意。因此我们分别选择了在腹腔给予大肠杆菌内毒素（2．sing／kg）2刁时、4刁时、8刁日不 16刁时后的4个时间点来对穹窿下器进行扫描电镜观察，同时应用透射电镜观察细胞结构上的改变。结果显示：扫描电镜观察结果：l、对照组的结果：从整体上看，SFO表而纤毛稀少，大部分
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R329

【参考文献】