Hsp90在热诱导Jurkat细胞凋亡中功能的初探

发布时间：2020-05-21 10:05

【摘要】：当人体细胞处在“升温”(＞37℃)的条件下，即受到热休克或称热应激的影响。“热”作为一种外界物理诱导物，经细胞表面受体或通过其他方式的介导，将信息传入核内，从而调节基因的特异性表达。热休克与细胞周期和细胞凋亡密切相关。在临床上已将局部热疗作为某些肿瘤治疗或放疗的辅助手段。但细胞热应激的本质及机理尚有待揭示。 热休克蛋白家族成员中的分子量为90kD的热休克蛋白(Hsp90)是真核细胞中最丰富的蛋白质之一。Hsp90能使在热休克等应激反应中积累的误折叠蛋白再折叠，并可促进已变性的蛋白质降解。Hsp90还参与激素受体、其他转录因子、信号途径和翻译起始阶段的激酶及一氧化氮合酶的成熟、胞内转运和活性调节。因此Hsp90在真核细胞中有着广泛而重要的功能。但迄今为止鲜见关于Hsp90在热休克诱导的细胞凋亡中功能研究的报道。 本论文首先对热休克诱导Jurkat细胞凋亡的条件进行了研究，包括不同的热休克温度及热休克时间诱导细胞凋亡的情况。在此基础上观察了持续性热休克、短时间热休克及恢复过程对细胞凋亡相关蛋白及Hsp90表达的影响；用cDNA点阵分析的方法研究了热休克引起的基因表达谱的变化以及Hsp90功能的抑制剂格尔德霉素geldanamycin(GA)对热休克后基因表达谱的影响。然后研究了GA在热休克诱导的细胞凋亡中的作用。最后应用反义基因表达技术，建立了内源性Hsp90β低表达的细胞株，并对Hsp90在热休克诱导的细胞凋亡中的作用机制进行了初步的探讨。 1．不同热休克条件对Jurkat细胞凋亡的影响 42℃热休克1h没有造成明显的细胞凋亡，而42℃热休克2h多聚核糖腺苷二磷酸聚合酶(PARP)蛋白出现明显的断裂，热休克后恢复过程中亚二倍体细胞逐渐增多，DNAladder逐步明显。45℃热休克15min后恢复过程中同样出现上述现象。说明42℃热休克2h和45℃热休克15min可以诱导细胞凋亡，并且45℃15min比42℃2h更为强烈地诱导细胞凋亡的发生。
【图文】：

图l不同热休克条件诱导PARP断裂的Wesetm印迹检测结F191CleavgaeofAPRPindueedbyheatshoeknaalyzedbywerPanel:Heatshoekat42Coofro，05，l，，2，3，4，6herPnael:Recoverofro，4，8，12hrfomheatshoekat42，CofrZhna

C15min及42℃Zh热休克后不l司恢复时间(hr)Jurkat细胞基f天}组DNAr包泳图谱nomieDNAeleetroPhoretogramofjurkateellsduringtrfomheatshoekat45℃1sminand42℃Zh凋亡相关分子表达的影响导对凋亡相关分子表达的影响能通过那些凋亡相关分子影响Jurkat细胞发生胞凋亡相关蛋白的表达变化。42℃持续热休sissuseeptibility)、Fasligand、TIAR、Bel一2、4)。IeH一IL(proeaspase一2)和Cpp32(proeaspP和FADD蛋白的表达逐渐减少(Fgi.5)。提示于细胞坏死，溶酶体破裂释放大量蛋白酶造
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R363

【共引文献】

相关会议论文 前1条

1 李忠浩;孔丽娟;刘庆华;杜娟;狄和双;王根林;;不同温度下荷斯坦奶牛外周血抗氧化指标的变化及其与淋巴细胞凋亡的关系[A];中国奶牛协会2007年会论文集（上册）[C];2007年

相关博士学位论文 前2条

1 杜娟;奶牛乳腺上皮细胞高温应答机制的研究[D];南京农业大学;2007年

2 周鸣杰;热刺激条件下血管内皮细胞的形态变化及凋亡研究[D];上海交通大学;2007年

相关硕士学位论文 前2条

1 朱利娜;酵母基因芯片的制备及其在热休克基因表达谱研究中的应用[D];第一军医大学;2002年

2 李忠浩;热应激对荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞凋亡与抗氧化特性的影响[D];南京农业大学;2007年

本文编号：2674107