高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化研究——过氧化体增殖物激活型受体的作用

发布时间：2020-05-23 17:13

【摘要】： 动脉粥样硬化性心血管病是一类严重危害人类健康的疾病。导致动脉粥样硬化的危险因素有多种，如血脂异常、高血压、糖尿病、吸烟、高同型半胱氨酸血症等。然而，动脉粥样硬化特征性病变为动脉壁富含脂质粥样斑块的形成。虽然促发动脉壁内皮细胞损伤、血循环单核细胞黏附内皮、巨噬细胞浸入血管壁、动脉壁脂质浸润以及巨噬细胞吞噬大量脂质涉及到多个细胞和分子事件，但至为关键的仍然是血脂异常，尤其是高胆固醇血症。目前人们已基本明确低密度脂蛋白胆固醇是促动脉粥样硬化病变形成因素，而高密度脂蛋白胆固醇则对动脉粥样硬化病变具有防止作用。高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用机制涉及逆向胆固醇转运、抗氧化、抑制血小板活化、保护血管内皮，这其中高密度脂蛋白的逆向胆固醇转运作用在防止动脉粥样硬化病变形成过程中起关键作用。然而，关于高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用主要来自人群调查资料和临床观察结果，在动物进行的高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化实验研究报道并不多，而关于高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用机理则更有许多未被人们完全弄清楚的。自从认识过氧化体增殖物激活型受体(PPARs)后，对于脂质代谢和糖内稳态的分子调节机制有了很大进展。然而，关于PPARs在高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化病变中的作用，报道的文献近几年虽然积累很迅速，但其中也有一些存有疑点的地方甚至相矛盾的。本课题研究了人高密度脂蛋白抗实验性家兔动脉粥样硬化作用，并以PPARs为切入点研究了PPARs在高密度脂蛋白介导胆固醇流出中的作用。易光辉学位论文中文摘要研究目的： 1．研究人血高密度脂蛋白mDL）注射液对饲喂高胆固醇饲料家兔血脂以及主动脉粥样指纹病变的影响。 2．建十－刷’新的应川U937泡沐细胞模型检定高密度脂蛋白外运细胞内胆固酵生物学活性的人江。应m该人沾检测IIDI。介导细胞内胆固醇流出生物学活性以及影响活件的因素。 3．探讨PPARsama和 PPARdelta在nL介导的细胞胆固醇流出中的作用及其叮宫杉韦。研究方祛：实验家兔给予1％胆固醇饲料2个月。实验分为预防性处理与治疗性处 j‘IZ。颀防件处理足在饲喂胆固醇饲料的同时注射HDL，而治疗性处理则是在饲喂胆固醇饲料 2个川后改为J价饲料的同时汁射 I＊I。。在此期问，，HDI。汁射液组分别静脉泞射人血＊1．25m＊＊mg，100mg／Vw 洛伐《门夕N仕卜注射 10mg／人／只：对照组静脉注射生理盐水”．9qNaCI）20ml；正常组喂饲标准饲料。人血mL注射液由消华紫光占汉生物制药集团竹限公d牛；十并提供。每万取兔耳缘静脉血测定血脂。苏丹＊染色观察士功脉粥样炳变爪况；；高效液相色谱沦测定卞动脉砰E巳固醇含量。将 U937细胞与 100 u g加l氧化低密度脂蛋白孵育 36 ’b时后，分另用个问浓度高密度脂蛋臼处理24小时，应川高效液相色谱m队C）检测细胞内胆固醇和胆固醇酯含虽。HDL＼ CUSO；八孵育，氧化修饰HDI。。HDI。与葡萄糖共孵育，糖基化修饰HDI。。取新鲜抗凝血浆，用超速离心机进行密度梯度离心，收集密度吕巨易光辉学位论文中文摘要 1．063－1．21g／cm’组分。U937细胞用 50－400 nmol＊反义 PPAR o、反义 PPAR 6 预处理细胞12小时。培养鹏37细胞与0．28 pm加川胆固醇乙醇液共孵育 24hr，1500rpm离心 10mi n，收集细胞，PBS漂洗 2次，RPMI－1640重；钻细胞，力 n1。继续培养0－＊刁日。研究W＊。、MR。、＊＊1在高密度脂蛋白介导细胞胆同醉流出中的作用分别应用激动剂和抑制剂卯PAR Y 特异性激动剂 ciglitazone，LXRa 禾 ABCA］激活剂 2引厂hydroxycholesterol 川Ch）、抑末剂 4，4’－bllsocyanostllbene－ Z，2’一disulfonic acid（DIDS））。液体闪烁计数仪狈细胞相对放射。叮强度。一步法 RT－PCR检狈 PPAR v、PPAR 6 mRNA表达水平；Western blottlns检测 PPAR Y、PPAR 6蛋白表达水平。研究结果：在实验期问，各组实验动物喂高胆固醇饲料后血脂水平均有升高。在颀l刘付处理实验，2个月后，实验动物卞动脉内膜表面富脂粥样病变相对面积分别为：对照组，32．6％士19．8％（三士S）；HDL注射液组，9．07％士7．15％；洛伐他汀组，ZO．8％士11．9巩仰－沾总胆固醇水平分别为：对照组，1005士23O my＊：HO卜组，292士1＊my引；洛伐他汀组，374士173md＊。血清高密度脂蛋自胆固醇水平分别为：对照组，43士12 my引；m刀。组，62士23 Illg／dl：洛伐他汀组，23士 14 Ilg／dl。HDL组血管壁胆固醇含量比对照组和洛伐他汀组都明显低。在治疗性处理实验，喂胆同醇饲料2个月改喂正常饲料后1个门后，实验动物上动脉内膜表面富脂粥样病变相对血积分别为：对照组，4个 9％士 21．9％G f S厂低、中、高剂量 IIDI，注射液组分别为， 17．1％士13．l％，11．7％士7．8％，7．0％士5．1％；洛伐他汀组，20．0％士19．
【图文】：

洛伐他汀,效应关系,粥样斑块,低剂量

中、低剂量HDL和洛伐他汀均能够减少主动脉壁斑块面积，高、中、低剂量间呈现一定的剂量·效应关系。高剂量HDL减少粥样斑块面积的作用明显优于洛伐他汀。实验观察结果见图1一1、图1一2和表1一9。注射HDL的三个剂量组相互进行比较以及分别与注射洛伐他汀组和生理盐水组进行比较的结果显示(见表1一10):三个剂量组的主动脉粥样斑块面积百分比均比注射生理盐水组显著降低，高剂量组病变程度明显低于注射洛伐他汀组。低、中、高三个剂量组的主动脉斑块面积百分比呈现明显的剂量一效应关系。三个剂量组主动脉内膜粥样斑块病变情况见图1一3。
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R363

【参考文献】