生物功能性有机胂酸的合成及其生物性质

发布时间：2020-05-30 22:52

【摘要】： 含砷化合物用于治疗癌症已有几百年的历史。自三氧化二砷（As_2O_3）成功地治疗急性早幼粒白血病（APL）以来，激起了人们对三氧化二砷及其相关化合物的广泛研究，拉开了世界范围内大量相关研究的序幕。除三氧化二砷外，其它已研究的砷化合物特别是有机胂如美拉胂醇、氧苯胂、甲基胂酸和二甲基胂酸等，虽然结果都表明可以诱导多种癌细胞凋亡，由于其毒性太大在临床上是不可接受的，，因此探索结构更为简单的、较低浓度下就可以诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞无影响的新型有机胂药物，意义重大。含砷化合物除具有诱导癌细胞凋亡的作用外，我们的研究还发现一些含砷化合物具有象超氧化物歧化酶（SOD）一样的作用，SOD是一种广泛存在于生物体内的金属酶，它能催化超氧阴离子自由基O2·-发生歧化反应，在防御生物体免受氧自由基损伤方面具有重要作用，有广泛的应用前景。但天然SOD普遍存在稳定性差，分子量大，不容易透过细胞膜，且有免疫原性等缺点，使其应用受到限制；所以SOD模拟物的研究成为广泛关注的课题。本文采用正交实验和方差分析，合成了一系列结构简单的、具有可诱导体外肿瘤细胞凋亡的新型脂肪族有机胂化合物（2—胂酸基乙酸、2—胂酸基乙酸甲酯和2—胂酸基乙酸乙酯），获得合成它们的最佳条件，即反应温度为25℃、反应时间为5个小时、三氧化二砷与卤代酸的配比为1：1。同时合成了一系列具有模拟超氧化物歧化酶（SOD）活性功能的新型芳香族有机胂Schiff碱配体及其配合物（2-羟基苯甲醛缩邻氨基苯胂酸、 2.4-二羟基苯甲醛缩邻氨基苯胂酸和它们的铜（II）、钴（II）锌（II）配合物），通过元素分析、摩尔电导、红外光谱及其电子光谱对它们的组成和结构进行了表征。与三氧化二砷相比，选择脂肪族有机胂化合物中的2—胂酸基乙酸（ASAC），通过（1）MTT法观察它们对细胞生长的影响，确定了实验用药的最佳浓度，（2）采用倒置显微镜观察实验组和对照组细胞形态学改变，采用透射电镜检测凋亡小体，（3）采用PI染色流式细胞仪检测实验组和对照组细胞凋亡峰和细胞周期的改变，（4）凝胶电泳观察凋亡细胞DNA的“梯形”条带等，观察As_2O_3和ASAC体外对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响并探讨其作用机制。结果表明： ------As_2O_3和ASAC明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖，抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性，且ASAC的抑制作用明显强于As_2O_3，当ASAC浓度为10-7mol.l-1时对正常血管内皮细胞几乎无毒副作用。 ------通过细胞形态学、流式细胞仪对DNA的测定及DNA凝胶电泳均证实，As_2O_3 WP=6 和ASAC均能诱导SMMC-7721细胞凋亡，在一定浓度范围内，凋亡率与As_2O_3和ASAC的作用时间呈依赖关系，且ASAC作用的效果更好。采用NBT法，对各种芳香族有机胂Schiff碱配合物在不同浓度下的抗超氧阴离子自由基活性进行了测定。测定结果表明： ----由于各配合物具有略有畸变的平面正方形构型，使得在歧化O2·-的过程中，易于O2佟ソザ灾行睦胱拥闹嵯蚺湮唬示硐殖鼋锨康幕钚浴Ｇ医蟂OD标准液活性强（同质量浓度比较）。 ----一方面Cu(Ⅱ)自身价态变化能力强而使其具有一定的歧化O2·-活性，另一方面其特有的d9价电子结构，使得铜配合物的活性最强。同时Cu(Ⅱ)配合物抑制率与浓度呈近对数变化关系。 ----配体共轭效应能力越强，越有利于超氧离子的歧化，表现为2.4-二羟基苯甲醛缩邻氨基苯胂酸类配合物的模拟SOD催化活性强于2-羟基苯甲醛缩邻氨基苯胂酸类配合物。 ----对于不同金属配合物，表现为铜（II）配合物最强，钴（II）配合物次之，锌（II）配合物最弱。
【图文】：

凋亡,实验组,贴壁性,核小体

SMMC-7721 细胞光学显微镜下的形态(10-7mol.l-1ASAC 作用 48h) 2细胞变圆折光性减弱变粗糙贴壁性减弱悬浮细胞更多tion of SMMC-7721 cells (treated with 10-6mol.l-1ASAC for and granulating, refraction weakened , more suspended c 部分图片如图 3.3-3.5 将 10-6mol.l-1As2O3和 10胞进行 HE 染色细胞核染色质深染聚集于核膜泡样小泡脱落形成含核小体片段的凋亡小体

早期形态,凋亡,核仁,细胞核

对照组透细胞核完整核仁清楚Fig3.6Normalcell(transmissionaleleccellnucleusintegrity,nucleolusclarityamph
【学位授予单位】：重庆大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R313

【参考文献】