地黄饮子对实验性脑缺血再灌注模型大鼠脑组织损伤的保护作用机制研究

发布时间：2020-06-07 23:11

【摘要】：研究目的：观察地黄饮子对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的影响,探讨地黄饮子对实验性脑缺血再灌注动物模型脑组织损伤保护作用的机制,为全面研究地黄饮子抗脑缺血损伤提供实验依据。研究方法： 1、地黄饮子对模型大鼠抗自由基氧化、抗细胞凋亡实验研究选用清洁级SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、尼莫地平阳性药物组、地黄饮子高、中、低剂量组,采用结扎双侧颈总动脉方法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型。假手术组及模型组灌胃生理盐水,地黄饮子高、中、低剂量组灌服相应药物,每天1次,连用7d后造模,尼莫地平术前30min皮下注射。造模后进行血清、脑组织SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量的测定,取脑组织进行Bax蛋白、Bcl-2蛋白、Caspase-3蛋白表达的检测。 2、地黄饮子对模型大鼠促血管新生实验研究选用清洁级SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、尼莫地平阳性药物组、地黄饮子高、中、低剂量组,采用结扎双侧颈总动脉方法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型。模型制作后第2日开始给药,假手术组及模型组灌胃生理盐水,地黄饮子高、中、低剂量组灌服相应药物,阳性药物组灌胃给予尼莫地平溶液,每天1次,连用7d。第8日灌注固定取脑,HE染色观察大脑海马形态学改变,用免疫组化法检测大鼠脑组织微血管密度(MVD)以及VEGF含量的表达。研究结果： 1、地黄饮子对模型大鼠抗自由基氧化实验结果 1.1大鼠血清抗自由基氧化检测结果：与模型组比较,阳性药物组和地黄饮子高、中、低剂量组均能显著升高SOD活性,地黄饮子高、中剂量组能显著降低MDA含量,地黄饮子高、中剂量组能显著升高CAT活性,各用药组对GSH-Px活性变化的影响无显著性差异。 1.2大鼠脑组织抗自由基氧化检测结果：与模型组比较,阳性药物组和地黄饮子高、中剂量组均能显著升高SOD活性,阳性药物组和地黄饮子高、中、低剂量组能显著降低iDA含量,阳性药物组和地黄饮子高、中、低剂量组能显著升高CAT活性,地黄饮子高剂量组能显著升高GSH-Px活性。 2、地黄饮子对模型大鼠脑组织抗细胞凋亡检测结果模型组大鼠Bax蛋白表达升高、Bcl-2蛋白表达降低、Caspase-3蛋白表达升高,与假手术组比较有统计学意义,各药物治疗组能降低Bax蛋白表达、升高Bcl-2蛋白表达、降低Caspase-3蛋白表达,与模型组比较有统计学意义。 3、地黄饮子对模型大鼠大脑海马形态学改变观测结果 HE染色结果：假手术组：脑组织无水肿,神经细胞、神经胶质细胞及毛细血管形态结构基本正常。模型组：海马区及其周围脑组织形成典型梗死表现。脑梗死区域可见大量神经元变性、坏死,胞体缩小变形,核固缩,噬神经元现象,胞浆呈嗜酸性,即为“红色神经元”改变；脑组织水肿,血管周围间隙增大,炎性细胞浸润。地黄饮子各剂量组：缺血范围比模型组小,病理改变较模型组轻。梗死区亦可见少量的神经元变性、坏死,可见少量的“噬神经元现象”：脑组织轻度水肿,血管轻度充血,无明显的炎性细胞浸润。 4、地黄饮子对模型大鼠脑组织促血管新生检测结果模型组MVD计数与假手术组比较无统计学意义,地黄饮子高、中、低剂量组和阳性药物组MVD计数较模型组增加,差异有统计学意义：模型组VEGF含量较假手术组升高,差异有统计学意义,地黄饮子高、中剂量组和阳性药物组较模型组均能升高VEGF含量表达,差异有统计学意义。研究结论： 1、地黄饮子能显著抑制模型大鼠血清SOD、CAT和脑组织中SOD、CAT、GSH-Px活性的降低以及MDA含量的升高,表明脑缺血再灌注后,脑组织内自由基产生增加,发生了明显的脂质过氧化反应,地黄饮子可以减少自由基的产生,减轻脂质过氧化反应,表现出良好的抗氧化损伤作用。 2、地黄饮子可下调Bax蛋白水平、上调Bcl-2蛋白水平,调节大鼠脑组织的bax/bcl-2平衡,下调Caspase-3蛋白水平,抑制神经细胞凋亡,减轻脑组织损伤。 3、地黄饮子能显著改善模型大鼠脑梗死区的病理改变,减轻脑组织水肿,减轻炎性细胞浸润等,对脑缺血区神经细胞功能的恢复表现出良好的效果。 4、地黄饮子能促进模型大鼠脑组织VEGF的释放和表达,促进脑梗死大鼠脑组织缺血区新血管形成,有明显的促血管新生作用。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R285.5

【参考文献】