IL-18－PE38重组免疫毒素及其治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究

发布时间：2020-07-07 06:54

【摘要】：目的: 自身免疫性疾病是目前公认的一类难治性人类重大疾病,严重威胁人类健康。实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)由于与人的多发性硬化病(MS)和急性脑脊髓炎在临床表现、生化指标及病理等方面具有相同特征性,因而一直是研究神经系统自身免疫性疾病的良好模型,也是Th1细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病的典型代表。目前这类疾病的治疗措施主要是长期采用各种非特异的免疫抑制剂,往往会使患者免疫系统受到普遍性抑制而导致严重的感染和肿瘤发生等。因而有关自身免疫性疾病的特异性免疫治疗一直是人们密切关注、有望成为一个突破口的研究热点。在近年基础免疫学研究进展的启发下,本课题选择新近发现的活化T细胞的表面标记IL-18受体(IL-18R)为靶点,构建重组免疫毒素IL-18-PE38的表达质粒,并通过基因治疗技术将其接种于EAE模型鼠体内,观察实验动物EAE症状及体征的改善情况以及相关细胞因子的动态变化来评价其治疗效果,并探讨其抗自身免疫性疾病的作用机理。 方法: (1)采用RT-PCR法从小鼠肝总RNA中扩增mlL-18目的基因片段,
【学位授予单位】：四川大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R392
【图文】：

利用Triozl试剂获得小鼠肝总RN.A，RNA电泳结果如图1一1所示，可见三条明显的主带，分别是5s一5.85，185和285，条带亮度良好，各条带区分明显，说明获得的总RNA浓度和纯度均较高。图1一1小鼠肝总RNA电泳图Fgil·1EleertoPhoresisPa材七mofotatlRNAoflivertissue1.2R-TPCR的扩增产物以小鼠肝总RNA为模板，用m几一18的特异性引物，通过Rl’-pCR扩增反应后

显示一条约46sobp大小的片段;而用Ndel舰indl、托nd皿EcoUI及NdeE/lco肚进行双酶切反应后，则分别显示有48obp、11sobp及1640bp左右的目的条带，如图1一3所示，这些片段的大小分别符合几一18、PE38及几一18一PE38基因片段的大小。因而从酶切结果显示，目的基因片段已正确插入到原核表达载体并构成了重组质粒PRKL一几18一E38，其结构示意图谱如图1一o4

Fgil一6LI一18一PE38序列测定DNAseuqneeeofL一18一PE38gnee

【参考文献】

相关期刊论文 前8条

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本文编号：2744793