MIN6细胞分泌过程的形态学研究

发布时间：2020-08-14 13:17

【摘要】：目的 观察胰腺B细胞株MIN6细胞分泌胰岛素动态过程中细胞形态的变化,从而为研究细胞分泌过程中细胞内的变化提供依据。 方法 图像增强的微分干涉显微镜(VEC-DIC)被用来观察给予刺激因素前后细胞形态的改变。共焦点荧光显微镜被用于观察新形成的空泡与细胞膜的关系。全反射荧光显微镜被用来观察MIN6细胞中胰岛素分泌颗粒的分泌过程以及这种分泌与形态学改变的关系。 结果 给予刺激因素后,MIN6细胞出现多种形态的空泡或者内陷。这些空泡主要出现在相邻的两个细胞之间,并且可以被EGTA,一种钙离子螯合剂在细胞外所阻断。肉毒杆菌神经毒素可以阻断分泌的过程但是并不能阻断空泡的形成,细胞松弛素D不能阻断空泡的形成,但是可以延长空泡的持续时间。 结论 MIN6细胞胰岛素的分泌和分泌过程中空泡的形成有着同一始发因素—细胞内钙离子浓度的升高。分泌和空泡形成却有着不同的发生机制。空
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R329.2
【图文】：

粒在空泡消失后重新出现在原来的部位，但是也有一些顺粒永久地消失了。葡萄糖刺激和KCI刺激引起的细胞形态变化有明显的区别，KCI刺激后空泡的出现比葡萄糖刺激后较快的出现(见图1)。KCI刺激后空泡开始出现的时间为12士345，而葡萄糖刺激后为30士7.55。空泡持续的时间在KCI刺激为189土385而在葡萄糖为125，115。图1高浓度葡萄糖和Ka刺激后细胞形态的改变。A:22mM葡萄糖刺激:B50nIMKa刺激HTI石显示细胞形态变化HTPS是一种水溶性但不能通过细胞膜的荧光染料。应用ITnS可以清楚地显现出细胞的形态。在给予刺激因素后，很多亮的区域出现，特别是在两个细胞之间。在刺激开始时，许多亮的空泡状区域出现，在共焦点荧光显微镜下呈现出串珠样改变。这种改变逐渐的缩小和消失。调节共焦点平面，可以发现这种串珠样区域实际是细胞膜内陷造成的，并且与细胞外空间相通(见图2)。

应用HTI喀给予刺激后得到的共焦点图像

表现为单峰。给予高浓度KCI刺激后，C扩+浓度很快升高，而给予葡萄糖刺激则升高的很缓慢(见图3)。细胞外的C扩+被彻底根除后，给予刺激因素并没有细胞形态改变发生(见图4)。1.601.401.201.00.0800.60.040.020.000gzueose束嵘者.‘.艺

本文编号：2793083