体外共培养人脐带间充质干细胞对肝星状细胞增殖的影响

发布时间：2020-09-21 19:38

【摘要】：目的探讨在体外共培养条件下,人脐带间充质干细胞对肝星状细胞增殖的调控机制。 方法采用Transwell间接共培养体系,实验组上层接种人脐带间充质干细胞(UCMSCs),下层接种肝星状细胞(HSCs-LX-2);对照组仅肝星状细胞单独培养。MTT法测肝星状细胞增殖抑制率；HOECHST染色法,直接观察肝星状细胞增殖抑制情况；流式分析技术检测各组肝星状细胞凋亡情况；ELISA法检测各实验组细胞上清液中TGF-β1蛋白的表达；荧光实时定量PCR检测各组肝星状细胞中TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表达；Western blot法检测各组肝星状细胞TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白的表达。 结果与对照组比较,实验组共培养24、48h,随着时间延长肝星状细胞增殖抑制率明显升高(P0.05)；HOECHST染色可见实验共培养组肝星状细胞凋亡增多,且48h较24h更明显(P0.05)；流式细胞分析示共培养组肝星状细胞凋亡多于对照组,且48h较24h更明显(P0.05)；上清液中,共培养组TGF-β1较对照组少,随着时间增加,差异更明显(P0.05)。共培养48h实验组TGF-β1及Smad3mRNA表达低于对照组,而Smad7mRNA表达高于对照组(P0.05)。共培养24h、48hTGF-β1、Smad3蛋白的表达均低于对照组,Smad7蛋白表达高于对照组(P0.05)。 结论人脐带间充质干细胞能够抑制肝星状细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能是通过下调TGF-β1、Smad3,上调Smad7蛋白表达而实现的。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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本文编号：2823908