一个人类α甘露糖苷酶全长cDNA的克

发布时间：2020-10-22 23:06

　　 机体的蛋白质大多以糖复合物的形式存在，而糖蛋白中的聚糖不但与蛋白质的生物学功能密切相关，而且本身也有着重要的生物学意义，因此成为继蛋白质和核酸之后又一生命科学的重要研究领域。尽管因为聚糖结构十分复杂，使其结构和功能的研究困难重重，但近年来，随着分子生物学知识和技术的渗入，极大地促进了糖蛋白聚糖结构和功能的研究。 α-甘露糖苷酶作为一种重要的糖加工酶，参与N-聚糖的加工成熟。为了研究其在聚糖生物合成中的作用，学者们已先后从酵母和多种哺乳动物细胞中克隆出了十多个不同的α-甘露糖苷酶的基因。本实验室也于数年前用抗人活化B淋巴细胞株3D5细胞的单克隆抗体6A8，自一个人扁桃体细胞λgt11 cDNA文库中筛选到了一个长1358bp的cDNA克隆，内含一个编码425个氨基酸的开放阅读框架。从此框架核苷酸序列推断的氨基酸序列与一个大鼠内质网α-甘露糖苷酶氨基酸序列的后二分之一高度同源。在1995年我们已向GenBank登记了这个cDNA序列，称之为6A8 cDNA。但是它的ORF起始密码子前没有终止密码子。为了确定其是否为全长cDNA，我们进行了人多种组织中6A8 mRNANorthern blot检测。结果表明6A8有两个转录本形式，一为±4.3kb，另一为±3.5kb。这表明1358bp cDNA非为全长cDNA。 以1358 bp cDNA作探针，从一个新购买的人扁桃体细胞λgt11 cDNA文库(ATCC No．37546)作Southern blot，筛选到了两个阳性克隆，克隆1和克隆2，长度分别为±2.1kb和±1.6kb，克隆1与1358 bp cDNA的5′端有594bp的重叠，
【学位单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：1999
【中图分类】：R346
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1 张立新;一个新的与大鼠内质网α甘露糖苷酶高度同源的人B淋巴细胞分化抗原的cDNA克隆与鉴定[D];中国协和医科大学;1997年

本文编号：2852204