白介素12对T淋巴细胞的凋亡诱导作用及对移植物抗宿主病的影响

发布时间：2020-10-27 03:02

　　 目的：IL-12是一种具有免疫调节功能的细胞因子，在细胞介导的免疫反应中起着关键作用。本实验试图研究1)IL-12是否能诱导T细胞凋亡；2)那些信号传导通路参与了凋亡诱导过程：3)T细胞那些表面分子是凋亡的效应者；4)在抗原诱导的免疫反应中，IL-12如何调节T细胞凋亡：5)IL-12诱导T细胞凋亡对T细胞功能亚群的影响。 材料方法：T细胞取自健康自愿者和骨髓移植后+14、+21、+60天慢粒患者，给予不同浓度(10-100ng／ml)IL-12处理后，Annexn V或TUNNEL法测细胞凋亡。表面分子标志(CD25、CD95、FasL、TNFR)分别用FITC、PE、生物素标记后上流式细胞仪检测，同时用半定量RT-PCR测FasL mRNA表达。正常T细胞与自体或异基因B细胞(Raji)混合培养，加入IL-12(50ng／ml)处理后，用流式细胞仪测定。测凋亡率(TUNNEL法)和表面分子CD25、CD95、FasL、TNPR。骨髓移植后+14、+21和+60天患者血中T细胞加入IL-12及信号传导抑制剂培养后，上流式细胞仪检测凋亡表面分子表达与T细胞亚群变化，免疫酶联双夹心法测IFN-r和IL-4滴度。 结果： 1、不论有无抗原刺激IL-12可以诱导T细胞凋亡，凋亡率与IL-12剂量，作用时间成正相关。 2、在诱导凋亡过程细胞表面CD25和FasL表达增高，Fas和TNFR变化不大，(p＞0.05) 3、半定量RT-PCR检测显示FasLmRNA表达亦上调。 4、Caspase-3抑制试验证明凋亡效应依赖于Caspare-3活性。 5、加入PTK、PKC和PKA信号传导抑制剂后均可使FasL表达下调。但不影响CD25表达。 6、骨髓移植后供体T细胞在IL－12作用下亦可被诱导凋亡，同时T细胞 亚群CD4AIDS比例增高，IFN－r滴度升高，IL－4滴度下降。 结论： l、IL．12可诱导T细胞凋亡。诱导凋亡效应呈时间和剂量依赖性。 2、IL－12可增加 T细胞表面分子 CD25表达率，提示几－12可使T细胞活 化增殖。 3、IL－12增加 T细胞表面 FasL表达，但对 Fas和 TNFR无明显作用，IL－12 通过Fa，FasL途径诱导凋亡。 4、Caspase习抑制试验证明 IL＊ 对 T细胞的凋亡诱导作用由 Fas＊asL 相互作用介导，并依赖 CAspAs卜3活性。 5、PTK、PKC和 PKA均涉及 IL－12诱导 T细胞凋亡过程。但不能阻断 CD25表达。说明IL－12对T细胞的诱导活化增殖和诱导凋亡作用是由不同信 号通路传递。只有PTK抑制可改变FaL rnRNA表达。 6、IL．12增强 hl免疫反应，增加 T细胞亚群 CD4／CDS比例。提示发生 凋亡的细胞以CDS＋细胞为主。可能有助于减轻GVHD。
【学位单位】：暨南大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2002
【中图分类】：R392
【部分图文】：

ACD3细胞纯度

CHAI004对IL一12作用的阻断效应
【参考文献】

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1 徐红薇,吴长有,李波,任欢,钟照华,李呼伦,邢淑贤,田景先;IL-12、IL-7、IL-2体外协同诱导人PBMC增殖和PBMC杀瘤活性的实验研究[J];中国免疫学杂志;1998年05期

本文编号：2857929