犬脐带间充质干细胞来源外泌体对血管内皮细胞增殖、迁移和凋亡的调控作用

发布时间：2020-10-29 22:09

　　 背景:以往研究发现,脐带间充质干细胞来源外泌体具有促进犬皮肤伤口愈合的作用,但犬脐带间充质干细胞来源外泌体对血管再生的作用机制尚未明确。目的:探讨犬脐带间充质干细胞来源外泌体对血管内皮细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响及其机制。方法:采用低温超高速离心法分离犬脐带间充质干细胞来源外泌体;采用血管内皮机械剥离和Ⅰ型胶原酶消化法分离犬血管内皮细胞并通过表面标记和分化特性对其进行鉴定。使用CCK-8法、划痕实验和Annexin V流式检测法测定犬脐带间充质干细胞来源外泌体对血管内皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响,高通量测序检测犬脐带间充质干细胞来源外泌体中miRNA的表达并探讨其可能性机制。结果与结论:实验成功建立了犬动脉血管内皮细胞的分离与培养方法,其形态呈铺路石状,阳性表达CD34和CD31表面蛋白;犬脐带间充质干细胞来源外泌体能显著促进血管内皮细胞增殖与迁移,抑制内皮细胞凋亡,而其作用机制可能是其中富含丰富的miRNA。
【文章目录】：
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文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
        1.3.1 实验动物与样品采集
        1.3.2 实验试剂和仪器
    1.4 实验方法
        1.4.1 犬脐带间充质干细胞分离培养和鉴定
        1.4.2血管内皮细胞原代培养和鉴定
        1.4.3 外泌体的分离和鉴定
        1.4.4 犬脐带间充质干细胞与血管内皮细胞共培养实验
        1.4.5 不同浓度犬脐带间充质干细胞外泌体对血管内皮细胞增殖的影响
        1.4.6 犬脐带间充质干细胞外泌体对血管内皮细胞迁移的影响
        1.4.7 犬脐带间充质干细胞外泌体对血管内皮细胞凋亡的影响
        1.4.8犬脐带间充质干细胞外泌体miRNA测序
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 犬血管内皮细胞的原代培养和鉴定结果
    2.2 犬脐带间充质干细胞外泌体分离和鉴定结果
    2.3 犬脐带间充质干细胞和脐带间充质干细胞外泌体对血管内皮细胞增殖的影响
    2.4 犬脐带间充质干细胞外泌体对血管内皮细胞迁移的影响
    2.5 犬脐带间充质干细胞外泌体对血管内皮细胞凋亡的影响
    2.6 犬脐带间充质干细胞外泌体测序结果
3 讨论Discussion

【参考文献】

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本文编号：2861526