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MicroRNA-128调控大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞

发布时间:2020-12-05 12:15
  背景与目的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)是干细胞家族的重要成员。BMSC具有多向分化潜能,特定的诱导条件下BMSC在体内或体外,可分化为骨、软骨、脂肪、韧带、肌腱、肌肉、肝、心肌、内皮、甚至神经等多种组织细胞。BMSC定向分化的研究已经成为研究热点,日益受到人们的关注。微小RNA(microRNA, miRNA)是具有调控功能的非编码RNA,其大小长约20-25个核苷酸,广泛存在于真核生物中并能通过与靶标基因的mRNA上的3′端非编码区特异结合配对来调节靶标基因的翻译或者保持其稳定性。有研究证实microRNA分子在转录水平和转录后水平参与控制骨髓基质干细胞多种基因的时空表达差异;发现miR-128高水平表达于中枢神经系统。有研究表明Wnt信号传导途径参与激活骨髓基质干细胞向神经细胞的定向分化。我们利用生物信息学软件分析,推测Wnt3a是microRNA-128的靶基因,microRNA-128可能通过调控Wnt3a影响骨髓基质干细胞向神经细胞的定向分化。因此,本实验通过两个部分来探讨MicroRNA-128对大鼠骨髓... 

【文章来源】:郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】:140 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

MicroRNA-128调控大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞


大鼠BMSCs细胞表面标志的表达A:CD29,阳性率99.26%,B:CD44,阳性率99.14%,C:CD105,阳性率98.45%,D:CD34,阳性率1.58%,E:CD45,,阳性率1.82%,

表达水平,细胞,检测结果,类似物


图 1-13 各组细胞 Wnta3 mRNA 表达水平比较rn-blot 检测结果样细胞标志蛋白结果检测结果: 空白对照组、诱导组、类组细胞神经元样细胞标志蛋白结果检测结果见图 1-14。7 胞标 志蛋白β3-tubulin, MAP-2, NF-M, NSE, GFAP, tin 在未诱导、未转染的空白组大鼠骨髓间充质干细胞中出现。而加人 bFGF 和 EGF 诱导的诱导组、类似物组和抑同程度的出现β3-tubulin, MAP-2, NF-M, NSE, GFAP,tin 的印迹;其中类似物组细胞β3-tubulin, MAP-2, NF Nestin, Vimentin 的印迹均显著弱于诱导组细胞,同时3-tubulin, MAP-2, NF-M, NSE, GFAP, Nestin, Vimenti强于诱导组细胞。说明①bFGF 和 EGF 诱导大鼠骨髓间充

免疫印迹,细胞,抑制剂,转染


1-14 各组细胞神经元样细胞标志蛋白免疫印迹检测结果:空白对照组、诱导组、类似物结果检测结果见图 1-15。在四组细胞中均有现,其中未诱导的空白组大鼠骨髓间充质浅;然后是诱导组, 诱导组,抑制剂组依次;抑制剂组细胞 Wnt3a 蛋白印迹最深。印迹致。说明转染 miR-128 mimics 上调 miR-1表达,转染 miR-128 Inhibitor 下调 miR-1表达。

【参考文献】:
期刊论文
[1]体外培养大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化:Wnt3a信号分子的诱导作用[J]. 阎文柱,秦书俭,刘学政,李德华.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(14)



本文编号:2899436

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