庚型肝炎病毒生物学特性及其与丙型肝炎病毒的比较研究
发布时间:2020-12-11 15:07
庚型肝炎病毒(hepatitis G virus,HGV)是新发现的经输血传播的单正链RNA病毒。HGV与黄病毒科的其它成员,尤其是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV),具有相似的基因组结构。HGV的开放读码框架(open reading frame,ORF)编码一个约2900个氨基酸的蛋白前体,与HCV的蛋白前体在氨基酸水平有25.5%的同源性。HGV除了核心蛋白存在与否仍有争议外,其前体蛋白在结构上与HCV的C-E1-E2-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B结构非常相似。然而,HGV和HCV在生物学特点上却差别显著。本研究利用已建立的HGV转基因Founder小鼠进行传代培育,获得了能稳定传代并较高表达的转基因小鼠品系,提供了一个可在分子水平、细胞水平和整体水平研究HGV的有效体系。以该转基因鼠为技术平台,本文亦在HGV体内外复制与表达、HGV致病性、HGV与HCV复制和表达差异及疫苗评价等方面进行了系列探讨。 一 全长HGV转基因小鼠的遗传育种与特性研究 转基因小鼠是病毒研究的有效体系,利用本室克隆出的完整HGV cDNA克...
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:84 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
HGvEZ抗原在转基因小鼠肝组织中的表达(200又)
第二军医大学博士论文B图1一5HGV转基因小鼠常规病理学切片观察(IOOx)Fig.1一5Histologiealfindingsoftransge垃eandnormalmice(100x)A,negativeeontraloflivertissuefromnormallittermate.B,livertissuefromtransgeniemouse东杯—一万)一—己下犷飞、、赢灿诚诵.入!嘛翩汀,礴乳二‘一报毖润。。~一..熟飞。一、‘泌脾一a抓抓咖翩俪咖咖俪锄蛔廊痴瓶耐蝙秘姗觑讥杨确确黑黑烈烈)大伫长份煞价六言户万二东言爪二忿不万沈二;二二二不下瓜石石万为\瑟一‘启秘。~公~概··嘶嘶八森枷骗枷而触嘛耐赫贴嘛瓢械哪嘛恤标耐画泌、、丁丁:井只几_几滋葬蕊一工二五了万二耳抓忘。洁认丈。。积一~一拱一,户·招r一£认一咫如一护抽;,性认··如如翩耐嘛私树抓{协诚咖洲翻~娜耐夕狱以啊‘沪卉‘~~~炭炭联贾二丫熟二二公之截于二兹拭二么狱甲二蕊三蔽蕊二.元甭一_…井『:、,、扮。“一甜、、粼,...。。帕、份八人砂产m衣俪六灯、扮~~一J叭尸冲介。~乃河八甘J详脚冷公介一~~介~一八,,b孔孔‘.冷乡双吧理训华卫次翼竺黑狱点淤’渭刃竺牛叮哭井兰
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【参考文献】:
期刊论文
[1]鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析[J]. 王宏卫,赵平,张珉,朱诗应,戚中田. 微生物学报. 2003(03)
[2]信号肽和辅助性T细胞表位增强HBV核心抗原DNA疫苗诱导的免疫应答[J]. 赵平,赵兰娟,曹洁,洪海燕,戚中田. 生物化学与生物物理学报. 2002(03)
[3]HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变[J]. 任浩,朱分禄,朱诗应,王路,戚中田. 世界华人消化杂志. 2002(01)
[4]丙型肝炎病毒E2蛋白对HepG2细胞MAPK/ERK的激活[J]. 赵兰娟,刘厚奇,曹洁,冯根生,戚中田. 生物化学与生物物理学报. 2001(06)
[5]庚型肝炎病毒转基因小鼠的建立[J]. 胡卫江,戚中田,胡以平,朱分禄,李建秀,陈景山. 中国病毒学. 2000(02)
[6]庚型肝炎病毒NS3蛋白在大肠杆菌中的表达[J]. 朱分禄,任浩,宋燕斌,戚中田. 中华微生物学和免疫学杂志. 1999(06)
[7]庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的拼接及克隆[J]. 朱分禄,戚中田,任浩,宋燕斌,邵力. 第二军医大学学报. 1998(04)
本文编号:2910747
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:84 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
HGvEZ抗原在转基因小鼠肝组织中的表达(200又)
第二军医大学博士论文B图1一5HGV转基因小鼠常规病理学切片观察(IOOx)Fig.1一5Histologiealfindingsoftransge垃eandnormalmice(100x)A,negativeeontraloflivertissuefromnormallittermate.B,livertissuefromtransgeniemouse东杯—一万)一—己下犷飞、、赢灿诚诵.入!嘛翩汀,礴乳二‘一报毖润。。~一..熟飞。一、‘泌脾一a抓抓咖翩俪咖咖俪锄蛔廊痴瓶耐蝙秘姗觑讥杨确确黑黑烈烈)大伫长份煞价六言户万二东言爪二忿不万沈二;二二二不下瓜石石万为\瑟一‘启秘。~公~概··嘶嘶八森枷骗枷而触嘛耐赫贴嘛瓢械哪嘛恤标耐画泌、、丁丁:井只几_几滋葬蕊一工二五了万二耳抓忘。洁认丈。。积一~一拱一,户·招r一£认一咫如一护抽;,性认··如如翩耐嘛私树抓{协诚咖洲翻~娜耐夕狱以啊‘沪卉‘~~~炭炭联贾二丫熟二二公之截于二兹拭二么狱甲二蕊三蔽蕊二.元甭一_…井『:、,、扮。“一甜、、粼,...。。帕、份八人砂产m衣俪六灯、扮~~一J叭尸冲介。~乃河八甘J详脚冷公介一~~介~一八,,b孔孔‘.冷乡双吧理训华卫次翼竺黑狱点淤’渭刃竺牛叮哭井兰
~截粉嘴一69KD添~~660图2一3SDS一PAGE和W已、ternblot分析F19.2一3SDS一PAGEand认笼stemblotar、alysesofPPagCdrivenexPressionA.SDS一PAGE.Lanesl一5:E即ressionofsL72o7/pZWNs3;。differenteoneentrationsofMgZ‘(50mmol几,0.lmmo]几,lmmol/L,IOmmol/L。20mmol/L);Lane6:MoleeularmassmarkerofhighrangeProtein.B.认七sternblot.Lanel:ExPressionofSL72O7/PZW;LaneZ:E却ressionofsL72o7zpz恻53inLBeontainingsommox几MgZ十;Lane3:E却ressionofsL72o7/Pz训53inLBeontaining1ommo一zLMgZ‘2.4HGV一Ns3及GFP融合蛋白在B16细胞的表达以含GFP和部分HGv一NS3基因的质粒pEGFPNS3/2转染B16细胞并经G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光(图2一4)。该转染的细胞株以GFP为报告基因,表达GFP一53/2融合蛋白,可作为检测小鼠CTL应答的刺激细胞或靶细胞。图2一4稳定转染pEGFPNs3/2的B16细胞发出的绿色荧光(‘200)Fig.2一4EnhaneedgreenfluoreseentProteininB16celistransfectedwithPlasmidPEGFPNS3/2(“200)2.5小鼠血清抗体的检测分别于首次免疫后第2、5、8、11周检测重组菌SL72o7币ZWNs3和对照菌sL7207/PZW口服免疫的小鼠血清抗HGV一NS3,4次检测结果证明
【参考文献】:
期刊论文
[1]鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析[J]. 王宏卫,赵平,张珉,朱诗应,戚中田. 微生物学报. 2003(03)
[2]信号肽和辅助性T细胞表位增强HBV核心抗原DNA疫苗诱导的免疫应答[J]. 赵平,赵兰娟,曹洁,洪海燕,戚中田. 生物化学与生物物理学报. 2002(03)
[3]HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变[J]. 任浩,朱分禄,朱诗应,王路,戚中田. 世界华人消化杂志. 2002(01)
[4]丙型肝炎病毒E2蛋白对HepG2细胞MAPK/ERK的激活[J]. 赵兰娟,刘厚奇,曹洁,冯根生,戚中田. 生物化学与生物物理学报. 2001(06)
[5]庚型肝炎病毒转基因小鼠的建立[J]. 胡卫江,戚中田,胡以平,朱分禄,李建秀,陈景山. 中国病毒学. 2000(02)
[6]庚型肝炎病毒NS3蛋白在大肠杆菌中的表达[J]. 朱分禄,任浩,宋燕斌,戚中田. 中华微生物学和免疫学杂志. 1999(06)
[7]庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的拼接及克隆[J]. 朱分禄,戚中田,任浩,宋燕斌,邵力. 第二军医大学学报. 1998(04)
本文编号:2910747
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