益生菌Lactobacillus casei Zhang对大鼠糖耐量受损改善作用和Ⅱ型糖尿病预防作用

发布时间：2020-12-11 19:37

　　不断的研究证据显示肠道菌群作为一个联系宿主基因型与环境因子的主要桥梁可能在糖代谢紊乱的致病中起着关键作用。本论文研究益生菌Lactobacillus caseiZhang对Ⅱ型糖尿病前期糖耐量受损大鼠预防及改善作用以及大鼠Ⅱ型糖尿病的预防作用，并对相关作用机制进行探讨。采用高果糖水诱导SD大鼠高胰岛素血症合并糖耐量受损来评价益生菌L. caseiZhang（1.0×109CFU/d只）的预防及改善作用。试验分为正常组（NC）、预防组（LP）和对应模型组（HMⅠ）、治疗组（LT）和对应模型组（HMⅡ）5个组。结果发现， L.casei Zhang可以显著预防和改善糖耐量受损大鼠口服糖耐量曲线AUC的明显升高，并显著升高肠道乳杆菌和双歧杆菌数量和显著降低肝糖原含量和梭菌数量（p<0.05）。在预防作用中，LP组体重、血清胰岛素水平和GLP-2水平明显低于HMⅠ组（p<0.05）。在治疗作用中，LT组肠道Bacteroides fragilis数量、血清骨钙素水平、肝脏AdipoR2、LXR-α和PPAR-γ mRNA水平均显著高于HMⅡ组，而MDA水平显著低于HMⅡ组（p<... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 血糖代谢紊乱
        1.1.1 糖耐量受损的概述
        1.1.2 Ⅱ型糖尿病的概述
    1.2 肠道菌群与宿主代谢
        1.2.1 肠道菌群的概述
        1.2.2 肠道菌群与血糖代谢关系相关学说
    1.3 益生菌
        1.3.1 益生菌及其功能和机制
        1.3.2 益生菌调节血糖作用及对Ⅱ型糖尿病人的有益作用
        1.3.3 益生菌 L.casei Zhang 的研究基础
    1.4 本研究的目的意义及主要内容
        1.4.1 立题背景和意义
        1.4.2 本课题研究的主要内容
2 材料和方法
    2.1 实验仪器和设备
    2.2 实验动物及其基础条件
        2.2.1 饲料配方
        2.2.2 实验动物的饲养
    2.3 试验设计
        2.3.1 试验一
        2.3.2 试验二
        2.3.3 试验三
    2.4 生化试验方法
        2.4.1 血糖以及口服糖耐量的测定
        2.4.2 内毒素、MDA、iNOS 以及肝糖原的测定
        2.4.3 氯离子浓度的测定
    2.5 ELISA 测定指标
    2.6 超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS）测定粪便中胆汁酸组成
        2.6.1 粪便样品的预处理
        2.6.2 仪器
        2.6.3 色谱条件
    2.7 肠道菌群总 DNA 的提取及其定量
        2.7.1 标准菌 DNA 的提取
        2.7.2 肠道菌群总 DNA 的提取
        2.7.3 菌群的实时 PCR 定量
    2.8 组织 RNA 的提取与表达定量
        2.8.1 组织 RNA 提取以及反转录
        2.8.2 基因 Real-time PCR 相对定量
    2.9 组织蛋白的提取与 Western blot
    2.10 组织切片的制作
    2.11 实验数据分析与统计
3 结果
    3.1 试验一
        3.1.1 各组大鼠体重的变化
        3.1.3 各组大鼠血清胰岛素水平的变化
        3.1.4 各组大鼠口服糖耐量水平的比较
        3.1.5 各组大鼠肝糖原含量的比较
        3.1.6 各组大鼠血清 GLP-2 水平的比较
        3.1.7 各组大鼠血清骨钙素水平的比较
        3.1.8 各组大鼠肠道优势菌群的比较
        3.1.9 各组大鼠血清 MDA 水平的比较
        3.1.10 各组大鼠小肠内容物总胆汁酸水平的比较
        3.1.11 各组大鼠肝脏脂联素受体-2 mRNA 的比较
        3.1.12 各组大鼠肝脏 LXR-αmRNA 水平的比较
        3.1.13 各组大鼠肝脏 PPAR-γmRNA 水平的比较
        3.1.14 各组大鼠肝脏 VKORC1 mRNA 水平的比较
        3.1.15 各组大鼠胰腺病理学评价
    3.2 试验二
        3.2.1 各组大鼠体重的变化
        3.2.2 各组大鼠空腹血糖的变化
        3.2.3 各组大鼠餐后 2h 血糖的变化
        3.2.4 各组大鼠口服糖耐量曲线
        3.2.5 各组大鼠血浆内毒素水平的变化
        3.2.6 各组大鼠血浆 iNOS 水平的变化
        3.2.7 各组大鼠血浆总胆汁酸水平的变化
        3.2.8 各组大鼠尿液氯离子的变化
        3.2.9 各组大鼠血清胰岛素水平的变化
    3.3 试验三
        3.3.1 各组大鼠体重的变化
        3.3.2 各组大鼠试验结束前口服糖耐量的比较
        3.3.3 各组大鼠血浆胰岛素水平和细胞因子的变化
        3.3.4 各组大鼠血浆总胆汁酸水平和氯离子浓度的比较
        3.3.5 各组大鼠肠道胆汁酸组成的比较
        3.3.6 各组大鼠盲肠菌群的比较
        3.3.7 各组大鼠胰腺相关基因和蛋白表达的变化
        3.3.8 各组大鼠肝脏和脾脏氯离子及相关基因转录和蛋白水平的变化
        3.3.9 各组大鼠肠道氯离子及相关基因和蛋白表达的变化
        3.3.10 各组大鼠大脑氯离子及相关基因和蛋白表达的变化
        3.3.11 各组大鼠肾脏氯离子及相关基因和蛋白表达的变化
        3.3.12 各组大鼠心脏氯离子及相关基因和蛋白表达的变化
        3.3.13 各组大鼠肌肉氯通道蛋白-1 水平的变化
        3.3.14 各组大鼠胰腺组织病理的影响
        3.3.15 各组大鼠对肝脏和肾脏组织病理的影响
4 讨论
    4.1 益生菌对糖耐量受损的改善作用
        4.1.1 益生菌对糖耐量受损的作用
        4.1.2 益生菌对胰腺损伤的作用
        4.1.3 益生菌对 GLP-2 的作用
        4.1.4 益生菌对 MDA 的作用
        4.1.5 益生菌对肠道菌群的作用
        4.1.6 益生菌对骨钙素的作用
        4.1.7 益生菌对维生素 K 和 VKORC1 表达的作用
        4.1.8 益生菌对 AdipoR2 的表达的作用
        4.1.9 益生菌对 LXR-α表达的作用
        4.1.10 益生菌对 PPAR-γ的表达的作用
    4.2 益生菌对二型糖尿病的预防作用以及其它新的功能
        4.2.1 益生菌 L. casei Zhang 预防Ⅱ型糖尿病的形成和疾病发展
        4.2.2 益生菌 L. casei Zhang 对总胆汁酸水平改善与Ⅱ型糖尿病风险
        4.2.3 益生菌 L. casei Zhang 对胆酸组成及相关肠道菌群的影响
        4.2.4 益生菌 L. casei Zhang 对氯离子代谢的作用
        4.2.5 益生菌 L. casei Zhang 对胰腺组织基因表达的影响
        4.2.6 益生菌 L. casei Zhang 对肝脏组织基因表达的影响
        4.2.7 益生菌 L. casei Zhang 对肠道组织基因表达的影响
        4.2.8 益生菌 L. casei Zhang 对骨骼肌组织基因表达的影响
        4.2.9 益生菌 L. casei Zhang 对心脏组织基因表达的影响
        4.2.10 益生菌 L. casei Zhang 对肾脏组织基因表达的影响
        4.2.11 益生菌 L. casei Zhang 对大脑部分组织基因表达的影响
        4.2.13 益生菌 L. casei Zhang 对胰腺、肝脏和肾脏组织病理的影响
5 结论
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of bile acid sequestrants in the treatment of type 2 diabetes[J]. Kohzo Takebayashi,Yoshimasa Aso,Toshihiko Inukai.  World Journal of Diabetes. 2010(05)
[2]益生菌Lb.casei Zhang对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及机制[J]. 托娅,杜瑞亭,张和平.  肿瘤防治研究. 2010(04)
[3]乳酸杆菌对攻毒小鼠的保护作用和对肠道菌群的影响[J]. 张和平,张七斤,任贵强,包秋华.  微生物学通报. 2007(03)



本文编号：2911104