EJ致敏的DC疫苗对人免疫重建荷人膀胱癌NOD/SCID小鼠的抗癌作用研究

发布时间：2021-01-04 00:39

　　目的：建立具有人免疫学特性的NOD/SCID小鼠模型；制备膀胱肿瘤EJ细胞裂解物致敏的DC疫苗,将其应用于具有人免疫学特性的荷人膀胱癌NOD/SCID小鼠进行膀胱癌的治疗,分析评价DC疫苗在模型小鼠体内抗膀胱癌的生物学效应,为DC疫苗治疗膀胱癌提供新的思路和理论基础。方法：第一部分：人免疫重建NOD/SCID小鼠模型的建立及其鉴定1.将经过渗漏筛查的16只正常NOD/SCID小鼠随机分为2组：实验组8只,每只腹腔注射人PBMC 4×107/0.5ml,作为人免疫重建组；对照组8只,每只腹腔注射0.5ml无菌PBS,作为空白对照组。2.从生物学特性和免疫学特性两个方面对小鼠模型进行鉴定：观察小鼠的生物学体征；第4周、8周、12周分别收集两组小鼠外周血、脾脏、肝脏：利用流式细胞术检测小鼠血中人CD3+T、CD19+B淋巴细胞；通过免疫组织化学染色的方法检测小鼠脾脏和肝脏组织中人CD3+T、CD19+B淋巴细胞的浸润情况；通过ELISA实验测定小鼠血中人IgG蛋白的含量。第二部分：EJ致敏的DC对人免疫重建荷人膀胱癌NOD/SCID小鼠的抗肿瘤作用1.利用细胞因子rhGM-CSF、rhIL-... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

正常状态下未发生GVHD的NOD/sCID小鼠小鼠免疫渗漏现象的检测

实验选用的16只4一6周龄NOD/SCID小鼠，其外周血血清中鼠IgG含量均低于5卜留ml(图3)，由此表明无免疫渗漏现象。 5040302010仑E︸6几︶。日鑫叭滋理夕/勺10， 11213141516图3全部小鼠外周血lgG含量

3.5免疫组织化学检测小鼠脾脏和肝脏中人的淋巴细胞移植人PBMC4周后免疫组织化学染色和光学显微镜观察显示:在实验组NOD/SCID小鼠脾脏组织中存在人CD3+T、CD19+B细胞(图5)，但在小鼠肝脏组织中未检测到人CD3+T、CD19+B细胞(图5);对照组 NOD/sCID小鼠在脾脏和肝脏中均未见人CD3十T、 CD19+B阳性标一记的细胞，因此亦可排除非特异性染色或抗原和抗体的交叉反应。只孚乐口乡哮‘:一毛扩{厂协:.口‘，门肝(对照组)肝(实验组)脾(对照组)脾(实验组)图5人化第4周时两组小鼠肝、脾人CD3十T、CD19+B细胞浸润情况

【参考文献】：
期刊论文
[1]膀胱肿瘤抗原致敏的树突状细胞诱导T淋巴细胞抗肿瘤效应的研究[J]. 王江平,王勤章,丁国富,闫东,钱彪.  现代肿瘤医学. 2008(12)
[2]肝癌mRNA致敏的DC对SCID荷瘤鼠的抑瘤作用[J]. 谢斌辉,刘凤恩,王小农,何晓,彭宝岗,梁力建.  岭南现代临床外科. 2008(05)
[3]膀胱癌患者外周血树突状细胞免疫状态变化及其临床意义[J]. 闫东,丁国富,倪钊,李应龙,王新敏,谢顺明,王江平,王勤章.  现代泌尿外科杂志. 2008(05)
[4]荷人膀胱癌SCID鼠人化复合模型的建立[J]. 王斌,米振国,李志斌,史天良,陈惠庆,宋继文,刘建武,张雁刚.  临床泌尿外科杂志. 2007(10)
[5]K562/NOD-SCID小鼠白血病模型的建立[J]. 宋艳秋,刘敏,李薇,王冠军.  中国实验血液学杂志. 2007(01)
[6]免疫重建SCID小鼠B淋巴母细胞瘤模型的建立[J]. 陈冬青,白连钧,刘庆丰,崔莲仙,何维,巴德年.  中国医学科学院学报. 2003(03)
[7]人骨髓间质干细胞向造血细胞分化潜能的实验研究[J]. 温冠媚,李浩威,肖庆忠,陈振光,张秀明,李艳,段连宁,李树浓.  中国病理生理杂志. 2003(02)
[8]树突状细胞及其肿瘤疫苗[J]. 张在云.  国外医学(肿瘤学分册). 2002(05)
[9]负载胃癌酸洗抗原树突状细胞诱导高效特异的抗胃癌细胞效应[J]. 吴淼,余佩武,蔡志民,吴军,王自强,周立新.  第三军医大学学报. 2002(10)
[10]成人外周血来源树突状细胞体外诱导培养及成熟调控[J]. 李胜富,冯刚,步宏,李幼平,张杰,杨宇如,卢一平.  生物医学工程学杂志. 2002(02)



本文编号：2955799