HIF-1α/SDF-1轴在低氧诱导祖细胞迁移和粘附中的作用

发布时间：2021-01-08 14:15

　　研究目的初步探讨低氧诱导因子-1α/间质细胞衍生因子-1（hypoxia-inducible factor-1alpha/ stromal cell-derived factor-1, HIF-1α/SDF-1）轴在低氧诱导祖细胞迁移和粘附至肺动脉内皮细胞中的作用,以期进一步了解肺血管重塑可能的分子和细胞学机制,进而为低氧性肺动脉高压的治疗提供新思路。方法以SD大鼠外周血祖细胞和SD大鼠肺动脉内皮细胞为研究对象,实验按下列步骤进行:1、SD大鼠外周血祖细胞的动员、分离和鉴定:粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员外周血祖细胞、免疫磁珠分离纯化SD大鼠外周血CD34/CXCR4阳性祖细胞、免疫荧光和流式细胞仪（FCM）鉴定CD34/CXCR4阳性祖细胞纯度。2、SD大鼠肺动脉内皮细胞的分离纯化培养:组织块贴壁法分离纯化SD大鼠肺动脉内皮细胞。3、收集常氧和不同低氧时间点6h、12h和24h的肺动脉内皮细胞:1)免疫荧光检测HIF-1α和SDF-1的表达情况;2)Western-blot检测HIF-1α蛋白表达情况;3)ELISA检测细胞培养上清液中SDF-1表达情况;4)ELISA检测HI... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

流式细胞检测CD34/CXCR4阳性细胞纯度为91%

2. 低氧不同时间点组与常氧组 HIF-1α 蛋白表达情况 检测不同低氧组和 HIF-1α 抑制剂组 SDF-112h、24h 诱导 SDF-1 的表达,6h 表达开始增强，1低氧 12h+HIF-1α 抑制剂组 SDF-1 的表达明显下降。0.01；与未加抑制剂比较：ΔP<0.05（图 3）。ELISA 标准曲线y = 1.573x + 1.261R2= 0.910710白蛋度对数浓值

图 3. ELISA 检测不同条件下 SDF-1 的表达情况别代表常氧对照组、低氧 6h、12h、24h 组和低氧 12h+F-1 轴在祖细胞迁移中的作用（图四）21%O2,5%CO2,74%N2h 组：1%O2,5%CO2,94%N2h+ HIF-1α 抑制剂 2-甲氧雌二醇（2ME2）组h+抗 SDF-1 组h+ HIF-1α 抑制剂 2-甲氧雌二醇（2ME2）+抗 SDIF-1α 和 SDF-1 表达后，低氧组的迁移指数高于常 相应抗体均可以使 CD34/CXCR4 阳性祖细胞向常氧对照组比：*P<0.05，** P<0.01，；加抑制剂用组与单纯低氧组比：ΔP<0.05（图 4）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧诱导肺动脉内皮细胞间质细胞衍生因子-1的表达及其调控机制[J]. 敖启林,朱朋成,葛小娜,卢玮,何惠华.  中华病理学杂志. 2006(09)
[2]低氧诱导因子-1α和内皮素-1基因在大鼠低氧性肺动脉高压中的表达[J]. 敖启林,郝春荣,熊密,王迪浔.  中华病理学杂志. 2002(02)
[3]低氧时NF-κB和P53在大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡中的变化[J]. 敖启林,熊密,郝春荣,王迪浔.  华中科技大学学报(医学版). 2002(01)



本文编号：2964743