乙型肝炎病毒表位PreS1基因工程抗体的获得——天然及免疫人源单链抗体库的构建

发布时间：2021-01-09 05:41

　　乙型肝炎病毒（HBV）感染是公认的防治难题。抗体性药物是乙型肝炎治疗领域的新方向之一。随着噬菌体展示技术的发展，抗体库的构建方案日趋成熟。全人源化乙型肝炎病毒基因工程抗体逐渐成为这一领域的研究热点。 抗体在保护性免疫过程中起着决定性作用。针对具体抗原表位的抗体才能满足预防感染或治疗的需要。乙型肝炎表面抗原（HBSAg）颗粒表面的PreS1抗原，是与HBV的侵袭密切相关的抗原表位。人源化高亲和力的Pres1抗体，将在抗体药物治疗HBV感染这一领域发挥作用。 本研究以抗体多样性的遗传机制为理论基础，借助噬菌体展示技术，以应用于临床治疗为目标，直接介入抗体工程的最前沿，全人源化基因工程抗体中的单链抗体。结合保护性免疫的最新进展，针对乙型肝炎病毒表位Pres1，为获得抗体性药物作了前期研究工作。 本研究以健康供血者的外周血淋巴细胞为来源，部分以偶联BSA的PreS1肽体外免疫后，分别提取总RNA，扩增抗体轻链和重链可变区基因，组装成单链抗体（scFv）基因。借助噬菌体展示技术，平行构建了天然及免疫人源单链抗体库。再以PreS1肽进行固相淘选，两个抗体库均获得了PreS1单链抗... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

单链抗体展示于噬菌体表面

的噬菌体就构成了噬菌体展示抗体库152.55].携带抗体的噬菌体就是噬菌体抗体，它能够与固相抗原结合，从而使噬菌体也被固定于固相表面。这就使筛选成为可能156-60〕。图4、图5为基因工程抗体展示于噬菌体的示意图。图4单链抗体展示于噬菌体表面

抗体基因可变区片段的半套式PCR扩增结果

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]两种蝮蛇毒类凝血酶基因的克隆表达与分离纯化[D]. 杨青.大连理工大学 2002



本文编号：2966076