丹黄明目汤对糖尿病视网膜病变激光术后大鼠VEGF表达的影响

发布时间：2021-01-17 03:15

　　目的:探讨丹黄明目汤对糖尿病视网膜病变激光术后大鼠血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。方法:采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射诱发大鼠糖尿病视网膜病变模型,并将造模成功的80只大鼠随机分为激光造模组（60只）、D组（20只）;激光造模组应用532氩激光对大鼠行全视网膜激光光凝治疗,可见明显激光斑形成即为激光造模成功。大鼠造模成功后随机分为A、B、C组。A、B、C组大鼠分别予丹黄明目汤、羟苯磺酸钙混悬液、蒸馏水灌胃,D组大鼠予蒸馏水灌胃。给药前后分别观察眼底,采用RT-PCR、Western-blotting法检测VEGF的相对表达量。结果:RT-PCR显示A组大鼠VEGF的表达水平显著低于B组、C组,差异均有统计学意义（P<0.05）。Western-blotting蛋白印迹示踪法显示A组大鼠VEGF表达明显低于B组、C组、D组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:丹黄明目汤可抑制糖尿病视网膜病变激光术后大鼠VEGF的表达。 

【文章来源】：中医药导报. 2019,25(18)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

VEGF基因PCR产物融解曲线

图.比山

2019年9月第25卷第18期September.2019Vol.25No.18一抗（兔抗∶稀释比例1∶500，鼠抗∶稀释比例1∶5000）一起孵育，4℃过夜。孵育结束，1*TBST洗3次，每次15min。滴加一抗于37℃湿盒内孵育2h，PBS漂洗5min×3次。完成后滴加用1*TBST稀释HRP标记的二抗（兔抗∶稀释比例1∶6000，鼠抗∶稀释比例1∶5000），将稀释后的二抗与膜共同孵育90min。孵育结束，1*TBST洗3次，每次15min。使用ECL化学发光液（Thermo）与膜孵育3min，用吸水纸吸尽液体，用保鲜膜包裹杂交膜，在暗盒内与X胶片曝光数秒至数分钟；显影冲洗。1.6统计学方法运用SPSS20.0统计软件进行处理，计量资料用（x±s）表示，用单因素方差分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1RT-PCR检测VEGF的表达情况VEGF基因PCR产物融解曲线峰值在84℃左右为单一峰值，峰形锐利，由此可知，无非特异性产物，定量准确（见图1）。A组大鼠VEGF表达水平低于B组及C组，差异均有统计学意义（P<0.05）。（图2、表2）其中每个实验均取20只大鼠的单只眼分别提取RNA，进行半定量PCR的检测，以实现这一实验的生物学重复，均得到一致结果。2.2Western-blotting检测结果A组和B组大鼠的VEGFmRNA表达变化趋势较为一致，A组大鼠VEGF表达明显低于B组、C组、D组，差异均有统计学意义（P<0.05）。（见表2、图3）每个实验均选取20只大鼠的单只眼分别进行蛋白的提取完成Western-blotting检测，以实现这一实验的生物学重复，均得

【参考文献】：
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博士论文
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硕士论文
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本文编号：2982087