骨髓间充质干细胞与内皮祖细胞对大鼠大部分肝切除合并缺血再灌注后损伤影响
发布时间：2021-01-17 09:15
目的通过制造大鼠肝脏缺血再灌注损伤合并大范围肝切除模型,探讨将骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）与骨髓内皮前体细胞（BM-EPCs）分别经门静脉移植入模型肝内,观察其对于鼠肝脏缺血再灌注肝损伤修复和肝脏再生中的作用,以及将两种细胞联合移植观察两种细胞是否存在协同作用促进肝脏缺血再灌注损伤修复和肝脏再生。方法通过细胞贴壁法从骨髓液中获得BM-MSCs和BM-EPCs。利用慢病毒携带绿色荧光蛋白（GFP）及红色荧光蛋白（RFP）分别对BM-MSCs及BM-EPCs进行细胞标记,为下一步将细胞移植入动物体内观察细胞的分布情况做准备。制作SD大鼠70%肝缺血再灌注损伤合并大范围肝切除手术模型,将SD大鼠随机分为四组:单独注射BMMSCs（n=12）、单独BM-EPCs（n=12）、联合注射BM-MSCs+BM-EPCs组（n=12）、单独注射PBS空白对照组（n=12）,按不同分组进行细胞移植,分别经大鼠门静脉注射GFP标记的BM-MSCs/200μL、RFP标记的BM-EPCs/200μL、BM-MSCs+BM-EPCs（BM-MSCs∶BM-EPCs=1∶1）/200μL、对照组注射PBS...
【文章来源】：石河子大学学报(自然科学版). 2019,37(04)北大核心
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
间充质干细胞和内皮祖细胞(×100)Fig．1Mesenchymalstemcellsandendothelialprogenitorcells(×100)
第4期雷振，等:骨髓间充质干细胞与内皮祖细胞对大鼠大部分肝切除合并缺血再灌注后损伤影响破坏轻微，仅见部分肝细胞轻度肿胀坏死，肝窦间隙少量红细胞淤积，肝小叶的结构细胞形态尚可。BM-MSCs+BM-EPCs组肝细胞条索结构破坏，肝细胞的细胞核消失，胞浆均质化，细胞间隙增大，出现较多的炎性细胞，周围可见明显的坏死灶(图7)。Suzuki法进行分类评分:与对照组比较，BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs组在细胞移植3d后大鼠肝脏HE染色充血程度、空泡化及坏死明显减轻(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs组肝细胞充血程度、空泡化及局部坏死也显著降低(P＜0.05)(图8a)。图7各组大鼠肝脏病理组织学改变HE(×200)Fig．7histopathologicalchangesofliverinratsineachgroupHE(×200)图8各组HE染色评分及TUNEL法检测差异统计学分析Fig．8HEstainingscoreandTUNELassaywerestatisticullyanalyzed2.8TUNEL检测各组大鼠肝组织细胞凋亡情况与对照组比较移植3d后BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs肝内细胞凋亡明显降低(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs肝内细胞凋亡程度明显降低(P＜0.05)。BM-MSCs组肝内细胞凋亡水平也显著低于BM-EPCs组(P＜0.05)(图8b、图9)。图9TUNEL检测各组大鼠肝细胞凋亡情况Fig．9TUNELwasusedtodetecttheapaptosisofhepatocytesineachgroupofrats305
第4期雷振，等:骨髓间充质干细胞与内皮祖细胞对大鼠大部分肝切除合并缺血再灌注后损伤影响破坏轻微，仅见部分肝细胞轻度肿胀坏死，肝窦间隙少量红细胞淤积，肝小叶的结构细胞形态尚可。BM-MSCs+BM-EPCs组肝细胞条索结构破坏，肝细胞的细胞核消失，胞浆均质化，细胞间隙增大，出现较多的炎性细胞，周围可见明显的坏死灶(图7)。Suzuki法进行分类评分:与对照组比较，BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs组在细胞移植3d后大鼠肝脏HE染色充血程度、空泡化及坏死明显减轻(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs组肝细胞充血程度、空泡化及局部坏死也显著降低(P＜0.05)(图8a)。图7各组大鼠肝脏病理组织学改变HE(×200)Fig．7histopathologicalchangesofliverinratsineachgroupHE(×200)图8各组HE染色评分及TUNEL法检测差异统计学分析Fig．8HEstainingscoreandTUNELassaywerestatisticullyanalyzed2.8TUNEL检测各组大鼠肝组织细胞凋亡情况与对照组比较移植3d后BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs肝内细胞凋亡明显降低(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs肝内细胞凋亡程度明显降低(P＜0.05)。BM-MSCs组肝内细胞凋亡水平也显著低于BM-EPCs组(P＜0.05)(图8b、图9)。图9TUNEL检测各组大鼠肝细胞凋亡情况Fig．9TUNELwasusedtodetecttheapaptosisofhepatocytesineachgroupofrats305
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞对小鼠肺脏缺血再灌注损伤的影响[J]. 孙常荣,侯念果,李会,帅训军,孙明洁,唐玉茹,徐堂文,艾登斌. 中国当代医药. 2018(05)
[2]人脐带间充质干细胞来源的外泌体减轻肝脏缺血再灌注损伤及机制的初步研究[J]. 冯啸,陈良,张琪,杨扬,陈规划,张英才. 中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2017(04)
[3]间充质干细胞预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 王珣,王帅,施晓雷. 现代医学. 2017(05)
[4]两种示踪方式的骨髓间充质干细胞在促进肝缺血再灌注损伤修复中的对比研究[J]. 杨青,秦书俭,包翠芬,单伟. 中国临床解剖学杂志. 2016(03)
[5]经不同方式移植骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的疗效[J]. 张雯,陈香宇,何巧玉,王闪,李春燕,段芳龄,黄华. 实用医学杂志. 2013(06)
[6]人脐带间充质干细胞对脂肪肝大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 张英才,杨扬,杨卿,刘剑戎,潘国政,张琪,陈规划. 中华普通外科杂志. 2011 (03)
硕士论文
[1]血红素加氧酶-1介导骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭的机制研究[D]. 张志恒.东南大学 2016
本文编号：2982591
【文章来源】：石河子大学学报(自然科学版). 2019,37(04)北大核心
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
间充质干细胞和内皮祖细胞(×100)Fig．1Mesenchymalstemcellsandendothelialprogenitorcells(×100)
第4期雷振，等:骨髓间充质干细胞与内皮祖细胞对大鼠大部分肝切除合并缺血再灌注后损伤影响破坏轻微，仅见部分肝细胞轻度肿胀坏死，肝窦间隙少量红细胞淤积，肝小叶的结构细胞形态尚可。BM-MSCs+BM-EPCs组肝细胞条索结构破坏，肝细胞的细胞核消失，胞浆均质化，细胞间隙增大，出现较多的炎性细胞，周围可见明显的坏死灶(图7)。Suzuki法进行分类评分:与对照组比较，BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs组在细胞移植3d后大鼠肝脏HE染色充血程度、空泡化及坏死明显减轻(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs组肝细胞充血程度、空泡化及局部坏死也显著降低(P＜0.05)(图8a)。图7各组大鼠肝脏病理组织学改变HE(×200)Fig．7histopathologicalchangesofliverinratsineachgroupHE(×200)图8各组HE染色评分及TUNEL法检测差异统计学分析Fig．8HEstainingscoreandTUNELassaywerestatisticullyanalyzed2.8TUNEL检测各组大鼠肝组织细胞凋亡情况与对照组比较移植3d后BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs肝内细胞凋亡明显降低(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs肝内细胞凋亡程度明显降低(P＜0.05)。BM-MSCs组肝内细胞凋亡水平也显著低于BM-EPCs组(P＜0.05)(图8b、图9)。图9TUNEL检测各组大鼠肝细胞凋亡情况Fig．9TUNELwasusedtodetecttheapaptosisofhepatocytesineachgroupofrats305
第4期雷振，等:骨髓间充质干细胞与内皮祖细胞对大鼠大部分肝切除合并缺血再灌注后损伤影响破坏轻微，仅见部分肝细胞轻度肿胀坏死，肝窦间隙少量红细胞淤积，肝小叶的结构细胞形态尚可。BM-MSCs+BM-EPCs组肝细胞条索结构破坏，肝细胞的细胞核消失，胞浆均质化，细胞间隙增大，出现较多的炎性细胞，周围可见明显的坏死灶(图7)。Suzuki法进行分类评分:与对照组比较，BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs组在细胞移植3d后大鼠肝脏HE染色充血程度、空泡化及坏死明显减轻(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs组肝细胞充血程度、空泡化及局部坏死也显著降低(P＜0.05)(图8a)。图7各组大鼠肝脏病理组织学改变HE(×200)Fig．7histopathologicalchangesofliverinratsineachgroupHE(×200)图8各组HE染色评分及TUNEL法检测差异统计学分析Fig．8HEstainingscoreandTUNELassaywerestatisticullyanalyzed2.8TUNEL检测各组大鼠肝组织细胞凋亡情况与对照组比较移植3d后BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs肝内细胞凋亡明显降低(P＜0.05)。且与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较，BM-MSCs组与BM-EPCs肝内细胞凋亡程度明显降低(P＜0.05)。BM-MSCs组肝内细胞凋亡水平也显著低于BM-EPCs组(P＜0.05)(图8b、图9)。图9TUNEL检测各组大鼠肝细胞凋亡情况Fig．9TUNELwasusedtodetecttheapaptosisofhepatocytesineachgroupofrats305
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞对小鼠肺脏缺血再灌注损伤的影响[J]. 孙常荣,侯念果,李会,帅训军,孙明洁,唐玉茹,徐堂文,艾登斌. 中国当代医药. 2018(05)
[2]人脐带间充质干细胞来源的外泌体减轻肝脏缺血再灌注损伤及机制的初步研究[J]. 冯啸,陈良,张琪,杨扬,陈规划,张英才. 中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2017(04)
[3]间充质干细胞预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 王珣,王帅,施晓雷. 现代医学. 2017(05)
[4]两种示踪方式的骨髓间充质干细胞在促进肝缺血再灌注损伤修复中的对比研究[J]. 杨青,秦书俭,包翠芬,单伟. 中国临床解剖学杂志. 2016(03)
[5]经不同方式移植骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的疗效[J]. 张雯,陈香宇,何巧玉,王闪,李春燕,段芳龄,黄华. 实用医学杂志. 2013(06)
[6]人脐带间充质干细胞对脂肪肝大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 张英才,杨扬,杨卿,刘剑戎,潘国政,张琪,陈规划. 中华普通外科杂志. 2011 (03)
硕士论文
[1]血红素加氧酶-1介导骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭的机制研究[D]. 张志恒.东南大学 2016
本文编号：2982591
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