TRM43355放线菌中蛋白对白色念珠菌生物膜形成的影响
发布时间：2021-01-17 21:52
白色念珠菌是条件致病菌,形成生物膜后耐药性增加,从放线菌次级代谢产物中获得能抑制生物膜形成的蛋白有一定应用前景。采用硫酸铵盐析法提取发酵液中的粗蛋白;微孔板半定量法检测菌株TRM43355发酵液粗提物、粗蛋白及不同理化因素处理后的粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成能力的影响。结果显示,菌株TRM 43355的粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成具有很好的抑制效果,蛋白浓度为2 mg/mL时抑制白色念珠菌生物膜形成效果最好,其抑制率可达92%以上。蛋白耐酸,但不耐高温,80℃以上的高温蛋白失活。经有机溶剂和金属离子处理后的粗蛋白对白色念珠菌生物膜的抑制率都有所提高。菌株TRM43355发酵液中的蛋白具有较强抑制生物膜活性。
【文章来源】：塔里木大学学报. 2019,31(03)
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
菌株TRM43355基于16SrRNA基因序列邻接法系统进化发育树
第3期1.5数据处理与分析以上实验数据均采用平均值±标准差形式表示以减少结果误差，使用软件Graphpadprism5进行绘图分析。2结果与分析2.1菌株TRM43355分类学鉴定TRM43355经过16SrRNA基因序列比对分析结果表明此菌株属于链霉菌属，与数据库中StreptomycesbarkulensisRC1831T具有最高相似性，相似度为99.06%。与其它链霉菌属种亲缘关系如图1所示。图1菌株TRM43355基于16SrRNA基因序列邻接法系统进化发育树2.2发酵液不同组分及粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成能力的影响使用微孔板半定量法检测发酵液的提取物对白色念珠菌ATCC64550生物膜形成的影响。如图2所示，菌株TRM43355的粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成具有很好的抑制效果，抑制率高达88.12%，其70%、95%甲醇洗脱分子的活性也比较显著。后续实验就放线菌TRM43355发酵液中的粗蛋白深入研究。图2菌株TRM43355发酵液提取物对白色念珠菌生物膜形成能力的影响袁琳琳等：TRM43355放线菌中蛋白对白色念珠菌生物膜形成的影响15
31%、82.98%和86.89%，当蛋白浓度为2mg/mL、2.5mg/mL和3mg/mL时相对生物膜形成能力分别为6.48%、7.71%和7.75%；蛋白浓度为0.25mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL时几乎不能达到抑制生物膜的效果，蛋白浓度为2mg/mL、2.5mg/mL和3mg/mL时抑制生物膜的效果较好，抑制率可达90%以上，因此不同的蛋白浓度对白色念珠菌生物膜形成影响较大，蛋白浓度越高生物膜形成能力越弱，抑制率越强；浓度为2mg/mL的蛋白浓度为最佳，继而后续活性测试都采用蛋白浓度为2mg/mL。图3不同浓度粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成能力的影响2.4粗蛋白经过不同理化因素处理后对白色念珠菌生物膜形成的影响2.4.1粗蛋白经不同pH处理后对白色念珠菌生物膜形成的影响实验为探讨不同pH处理后的蛋白对白色念珠菌生物膜形成的影响，用不同pH处理蛋白，并进行活性检测，pH值为7时处理的蛋白为未处理组，结果如图4所示，当蛋白pH值为3时相对生物膜形成能力为6.57%；当蛋白pH值为5时相对生物膜形成能力为22.9%；当蛋白pH值为7时相对生物膜形成能力为39.79%；当蛋白pH值为9时相对生物膜形成能力为12.74%；当蛋白pH值为11时相对生物膜形成能力为19.58%。实验结果发现，通过不同pH处理的粗蛋白对白色念珠菌生物形成能力的影响并不大，pH值为3时生物膜形成能力最差，其抑制白色念珠菌生物膜的活性最好，pH值为9时次之。图4pH对粗蛋白抑制白色念珠菌生物膜形成能力的影响2.4.2粗蛋白经不同温度处理后对抑制白色念珠菌生物膜形成的影响实验为探讨温度对蛋白质活性的影响，把温度-20℃设为未处理
【参考文献】：
期刊论文
[1]两株放线菌次生代谢产物的分离和鉴定[J]. 张仁文,罗晓霞,冯沛仙,万传星,张利莉. 塔里木大学学报. 2017(01)
[2]复方三黄液对铜绿假单胞菌体外抑菌及抑膜效果实验观察[J]. 郭庆昕,陈长贤,饶华春,周晓兰,钟黎鹃,陈水绵. 医学理论与实践. 2015(19)
[3]Cu2+对生物膜及其胞外聚合物的影响[J]. 胡学伟,李姝,荣烨,江孟,张燕,李媛. 化工学报. 2014(03)
[4]白色念珠菌生物膜的影响因素[J]. 钟雪锋,孙铁英,柯会星. 中国医刊. 2013 (05)
[5]激光共聚焦显微镜和改良微孔板法观察细菌生物膜形成[J]. 宋菲,向军,陆树良. 中国感染与化疗杂志. 2010(05)
硕士论文
[1]抑制表皮葡萄球菌生物膜形成的放线菌筛选及其作用机制研究[D]. 谢婷婷.塔里木大学 2016
[2]基于Ras-cAMP通路探讨黄芩苷单用或联合氟康唑对白念珠菌生物膜的抑制作用及机制[D]. 施高翔.安徽中医药大学 2015
本文编号：2983655
【文章来源】：塔里木大学学报. 2019,31(03)
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
菌株TRM43355基于16SrRNA基因序列邻接法系统进化发育树
第3期1.5数据处理与分析以上实验数据均采用平均值±标准差形式表示以减少结果误差，使用软件Graphpadprism5进行绘图分析。2结果与分析2.1菌株TRM43355分类学鉴定TRM43355经过16SrRNA基因序列比对分析结果表明此菌株属于链霉菌属，与数据库中StreptomycesbarkulensisRC1831T具有最高相似性，相似度为99.06%。与其它链霉菌属种亲缘关系如图1所示。图1菌株TRM43355基于16SrRNA基因序列邻接法系统进化发育树2.2发酵液不同组分及粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成能力的影响使用微孔板半定量法检测发酵液的提取物对白色念珠菌ATCC64550生物膜形成的影响。如图2所示，菌株TRM43355的粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成具有很好的抑制效果，抑制率高达88.12%，其70%、95%甲醇洗脱分子的活性也比较显著。后续实验就放线菌TRM43355发酵液中的粗蛋白深入研究。图2菌株TRM43355发酵液提取物对白色念珠菌生物膜形成能力的影响袁琳琳等：TRM43355放线菌中蛋白对白色念珠菌生物膜形成的影响15
31%、82.98%和86.89%，当蛋白浓度为2mg/mL、2.5mg/mL和3mg/mL时相对生物膜形成能力分别为6.48%、7.71%和7.75%；蛋白浓度为0.25mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL时几乎不能达到抑制生物膜的效果，蛋白浓度为2mg/mL、2.5mg/mL和3mg/mL时抑制生物膜的效果较好，抑制率可达90%以上，因此不同的蛋白浓度对白色念珠菌生物膜形成影响较大，蛋白浓度越高生物膜形成能力越弱，抑制率越强；浓度为2mg/mL的蛋白浓度为最佳，继而后续活性测试都采用蛋白浓度为2mg/mL。图3不同浓度粗蛋白对白色念珠菌生物膜形成能力的影响2.4粗蛋白经过不同理化因素处理后对白色念珠菌生物膜形成的影响2.4.1粗蛋白经不同pH处理后对白色念珠菌生物膜形成的影响实验为探讨不同pH处理后的蛋白对白色念珠菌生物膜形成的影响，用不同pH处理蛋白，并进行活性检测，pH值为7时处理的蛋白为未处理组，结果如图4所示，当蛋白pH值为3时相对生物膜形成能力为6.57%；当蛋白pH值为5时相对生物膜形成能力为22.9%；当蛋白pH值为7时相对生物膜形成能力为39.79%；当蛋白pH值为9时相对生物膜形成能力为12.74%；当蛋白pH值为11时相对生物膜形成能力为19.58%。实验结果发现，通过不同pH处理的粗蛋白对白色念珠菌生物形成能力的影响并不大，pH值为3时生物膜形成能力最差，其抑制白色念珠菌生物膜的活性最好，pH值为9时次之。图4pH对粗蛋白抑制白色念珠菌生物膜形成能力的影响2.4.2粗蛋白经不同温度处理后对抑制白色念珠菌生物膜形成的影响实验为探讨温度对蛋白质活性的影响，把温度-20℃设为未处理
【参考文献】：
期刊论文
[1]两株放线菌次生代谢产物的分离和鉴定[J]. 张仁文,罗晓霞,冯沛仙,万传星,张利莉. 塔里木大学学报. 2017(01)
[2]复方三黄液对铜绿假单胞菌体外抑菌及抑膜效果实验观察[J]. 郭庆昕,陈长贤,饶华春,周晓兰,钟黎鹃,陈水绵. 医学理论与实践. 2015(19)
[3]Cu2+对生物膜及其胞外聚合物的影响[J]. 胡学伟,李姝,荣烨,江孟,张燕,李媛. 化工学报. 2014(03)
[4]白色念珠菌生物膜的影响因素[J]. 钟雪锋,孙铁英,柯会星. 中国医刊. 2013 (05)
[5]激光共聚焦显微镜和改良微孔板法观察细菌生物膜形成[J]. 宋菲,向军,陆树良. 中国感染与化疗杂志. 2010(05)
硕士论文
[1]抑制表皮葡萄球菌生物膜形成的放线菌筛选及其作用机制研究[D]. 谢婷婷.塔里木大学 2016
[2]基于Ras-cAMP通路探讨黄芩苷单用或联合氟康唑对白念珠菌生物膜的抑制作用及机制[D]. 施高翔.安徽中医药大学 2015
本文编号：2983655
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