Wnt/β-catenin信号对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调控机制研究

发布时间：2021-04-19 06:06

　　结核病是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, Mtb）感染导致的一种严重危害人类及动物健康的重大传染病,给人类公共卫生安全造成严重威胁。肺泡巨噬细胞作为结核分枝杆菌感染的靶细胞在抗结核感染过程中具有重要作用。宿主-病原相互作用所致的炎性反应、巨噬细胞凋亡与坏死对结核病的发生发展及转归具有决定性作用。但该过程十分复杂,并受到多种信号调控。最新研究表明,Wnt/β-catenin信号对多种感染性疾病的发生发展具有重要的调控作用,但其对结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用过程中导致的巨噬细胞炎性反应、凋亡与坏死的调控机制尚未完全阐明。因此,探讨Wnt/β-catenin信号对肺泡巨噬细胞抗结核分枝杆菌的免疫调节作用具有重要的科学理论意义。本研究以小鼠肺泡巨噬细胞系RAW264.7为靶细胞,用结核分枝杆菌疫苗株BCG感染并用Wnt3a条件培养基和DKKl分别激活和阻断RAW264.7细胞的Wnt/β-catenin信号,并用双荧光素酶报告系统检验WWnt/β-catenin信号通路的激活与阻断效果,同时通过流式细胞术、激光共聚焦技术、电镜、ELISA、实时荧光定量P... 

【文章来源】：宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
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图表索引目录
第一章 文献综述及目的意义
    1.1 结核分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用
        1.1.1 结核分枝杆菌诱发巨噬细胞的炎性反应
        1.1.2 结核分枝杆菌与宿主细胞的凋亡和坏死
    1.2 Wnt/β-catenin信号通路与细胞程序性死亡
        1.2.1 Wnt/β-catenin信号通路简介
        1.2.2 Wnt/β-catenin信号通路对炎性反应调控的作用
        1.2.3 Wnt/β-catenin信号通路对细胞凋亡与坏死的调控作用
    1.3 研究目的及意义
第二章 Wnt/β-catenin信号对结核分枝杆菌感染后巨噬细胞发生炎性反应的调控作用
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 试验材料及试剂
        2.2.2 主要仪器
        2.2.3 试验设计及技术路线
        2.2.4 试验方法
        2.2.5 数据统计分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 Wnt/β-catenin信号通路激活与阻断效果检验
        2.3.2 Wnt/β-catenin信号对BCG感染巨噬细胞TLR-NFkB信号通路的影响
        2.3.3 Wnt/β-catenin信号对BCG感染后巨噬细胞炎性因子的调控
    2.4 小结
第三章 Wnt/β-catenin信号对结核分枝杆菌感染后巨噬细胞凋亡的调控作用
    3.1 引言
    3.2 试验材料与方法
        3.2.1 试验材料及试剂
        3.2.2 主要仪器
        3.2.3 试验设计及技术路线
        3.2.4 试验方法
        3.2.5 数据统计分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 Wnt/β-catenin信号提高了BCG感染后巨噬细胞的凋亡率
        3.3.2 Wnt/β-catenin信号对凋亡相关蛋白的表达的影响
        3.3.3 Wnt/β-catenin信号对线粒体膜电位的影响
        3.3.4 凋亡细胞的超微结构观察
        3.3.5 Hochest和TUNEL染色
        3.3.6 Wnt/β-catenin信号诱导巨噬细胞凋亡依赖于caspase途径
        3.3.7 Wnt/β-catenin信号对BCG感染后RAW264.7细胞周期的调控机制研究
    3.4 小结
第四章 Wnt/β-catenin信号对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染过程中细胞坏死的调控作用
    4.1 引言
    4.2 试验材料与方法
        4.2.1 试验材料及试剂
        4.2.2 主要仪器
        4.2.3 试验设计及技术路线
        4.2.4 试验方法
        4.2.5 数据统计分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 BCG感染可导致巨噬细胞坏死
        4.3.2 激活Wnt/β-catenin信号通路可减轻BCG感染导致的巨噬细胞坏死
        4.3.3 正常巨噬细胞与坏死细胞的超微结构
        4.3.4 激活Wnt/β-catenin信号通路后抑制BCG感染后巨噬细胞坏死的机制研究
    4.4 小结
第五章 结论与讨论
    5.1
    5.2
    5.3
    5.4
参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用的研究进展[J]. 刘云霞,张万江.  中国细胞生物学学报. 2012(06)
[2]肿瘤坏死因子-α在抗结核免疫中的作用研究进展[J]. 宋艳华,高孟秋.  中国防痨杂志. 2012(04)
[3]Specific Inhibitory Protein Dkk-1 Blocking Wnt/β-catenin Signaling Pathway Improve Protectives Effect on the Extracellular Matrix[J]. 叶树楠,王晶,杨述华,许伟华,谢卯,韩奎敬,张波,吴子晏.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2011(05)
[4]肺结核患者细胞因子水平测定的临床研究[J]. 杨颖乔,彭圣威.  咸宁学院学报(医学版). 2009(03)
[5]结核分枝杆菌感染细胞的信号传导通路研究进展[J]. 黄晓燕,严杰,李淑萍.  中国人兽共患病学报. 2006(08)
[6]细胞凋亡通路研究进展[J]. 王海燕,王来栓.  国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2003(05)



本文编号：3146990