TLN1-PI3K/AKT通路调控骨髓间充质干细胞成骨分化

发布时间：2021-04-19 17:19

　　目的探讨Talin1在骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cell,MSC）成骨分化中的作用及其调控机制。方法诱导MSC成骨分化后通过qRT-PCR及Western blot检测TLN1的表达变化,在MSC中敲低TLN1后采用CCK-8检测细胞增殖能力改变,利用ALP活性检测及茜素红染色观察成骨分化变化情况。通过Western blot实验研究TLN1在MSC成骨分化过程中参与的分子机制。结果 qPCR及Western blot结果提示,TLN1在成骨分化过程中表达上升;siRNA敲低TLN1表达后,MSC增殖无明显差异,ALP活性及矿化结节定量较对照组下降（P<0.05）。Western blot结果显示敲低TLN1表达后p-AKT表达下降,回补实验证明激活PI3K-AKT表达可回复MSC的成骨分化能力。结论诱导MSC成骨分化后TLN1表达逐渐上调,敲低TLN1后通过PI3K-AKT通路抑制骨髓间充质干细胞成骨分化。 

【文章来源】：岭南现代临床外科. 2019,19(04)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
        1.2.1 MSC的分离与培养
        1.2.2 成骨分化诱导
        1.2.3 茜素红染色及定量
        1.2.4 碱性磷酸酶（ALP）活性检测
        1.2.5 siRNA转染细胞
        1.2.6 细胞增殖试验
        1.2.7 实时荧光定量PCR
        1.2.8 Western blot检测
        1.2.9 PI3K/AKT通路激活剂SC-79回补实验
        1.2.1 0 统计学分析
2 结果
    2.1 TLN1与MSC成骨分化功能呈正性相关
    2.2 敲低TLN1后抑制MSC成骨分化功能
    2.3 敲低TLN1后抑制PI3K/AKT通路
    2.4 激活PI3K/AKT通路可回复成骨分化功能
3 讨论



本文编号：3147977