siRNA-P300鞘内注射对神经病理性疼痛大鼠模型HIF-1α/VEGF和ERK通路的影响
发布时间：2022-02-08 19:02
目的探讨神经鞘内注射P300小分子干扰RNA（siRNA-P300）对神经病理性疼痛（NP）大鼠模型低氧诱导因子1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子（VEGF）及细胞外信号调节激酶（ERK）通路的影响。方法 32只鞘内置管成功的雄性SD大鼠,随机平均分为假手术组、模型组、阴性对照组（加入阴性对照质粒）、siRNA-P300组（加入siRNA-P300）,每组各8只。坐骨神经慢性压迫性损伤法（CCI）构建NP大鼠模型。于术前1 d及术后1 d、3 d、5 d、7 d、9 d、14 d检测各组大鼠机械痛阈与热痛阈;qRT-PCR检测P300 mRNA水平;Western blot检测P300、Ac-H3、HIF-1α、VEGF及ERK通路相关蛋白表达;ELISA法检测脊髓液中疼痛介质及神经炎性因子水平。结果与术前相比,术后不同时间点各组大鼠机械痛阈、热痛阈降低（P<0.05）。与假手术组相比,模型组、阴性对照组、siR NA-P300组大鼠IL-4及IL-10水平显著降低（P<0.05）,P300 mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白、疼痛介质5-HT、SP、GABA、炎性因子IF...
【文章来源】：中国现代医生. 2019,57(20)
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
各组NP大鼠P300、Ac-H3蛋白表达表3各组NP大鼠P300mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白相对表达水平
中国现代医生2019年7月第57卷第20期CHINAMODERNDOCTORVol.57No.20July2019·基础医学·图2各组NP大鼠HIF-1α/VEGF、ERK通路相关蛋白表达中枢敏化，并可采用机械痛阈、热痛阈检测疼痛行为，且具有操作简单、创伤性小等优点[10]。因此，本研究通过构建CCI模型进一步探究NP有效治疗方法及其可能作用机制，为提高NP治疗效果提供一定理论依据。P300属于组蛋白乙酰转移酶且具有辅助激活因子作用，组蛋白去乙酰化酶可对NP发挥镇痛作用，进一步研究显示大鼠脊髓中P300表达水平升高并可促进NP发生[11-12]，但关于其具体作用机制及可能作用通路尚未解释清楚。研究显示在SNL大鼠模型鞘内注射P300抑制剂可能通过抑制P300介导p65乙酰化并促使核因子κB（NF-κB）表达水平降低，这可为神经疼痛的治疗提供靶点[13]。本研究构建CCI模型并采用siRNA-P300鞘内注射观察大鼠机械痛阈及热痛阈变化，结果显示术后不同时间点各组NP大鼠机械痛阈及热痛阈均明显降低，提示NP模型大鼠造模成功。术后5d、14dsiRNA-P300组NP大鼠机械痛阈及热痛阈均明显高于模型组、阴性对照组，说明鞘内注射P300的siRNA可有效提高NP大鼠痛阈，提示P300在NP发生过程中发挥重要作用。本研究结果显示模型组、阴性对照组及siRNA-P300组NP大鼠P300mRNA、蛋白及Ac-H3蛋白表达水平均显著高于假手术组，siRNA-P300组显著低于模型组，其中组蛋白Ac-H3属于P300乙酰化作用底物[14]，分析原因可能为siRNA-P300可通过抑制脊髓P300表达并减弱P300介导的组蛋白乙酰化作用进而抑制下游疼痛基因表达。提示siRNA-P300鞘内注射可提高NP大鼠痛阈。神经免疫系统紊乱及炎症介质异常分泌可引发NP，因而探讨siRNA-P300鞘内注射对NP大鼠体内炎性介质的影响具有重要意义[15]。?
【参考文献】：
期刊论文
[1]加味当归芍药散抑制组蛋白乙酰化酶p300/血清环加氧酶-2通路调控核因子E2相关因子2在黄褐斑形成中的作用机制研究[J]. 李燕红,杨谦,李锦亮,庄锦填,李振洁,钟金宝. 山西医药杂志. 2017(24)
[2]神经病理性疼痛大鼠模型接受免疫球蛋白干预后疼痛程度及神经炎症反应程度的分析[J]. 鲁智生,周江平,刘禹利,石学银. 海南医学院学报. 2017(07)
[3]神经鞘内转染siRNA-p300对大鼠神经病理痛阈值的影响[J]. 王鹏,郝伟,张颖,任立洁,张艳莉,单世民. 中国中西医结合外科杂志. 2016(05)
[4]慢性压迫损伤性神经病理性疼痛大鼠模型中脊髓背角ERK、CREB、BDNF表达的变化[J]. 徐良,裘涛,张丽娟,张伟骏. 浙江医学. 2016(16)
[5]鞘内注射乙酰化酶p300抑制剂Garcinol对大鼠神经病理性痛的影响[J]. 王依慰,刘清珍,陈春龙,支亦博,章洁,李伟彦. 临床麻醉学杂志. 2016(06)
[6]ERK/CREB信号通路在异菝葜皂苷元促进Aβ损伤SH-SY5Y细胞BDNF表达中的作用[J]. 张瑞,夏志明,孙小余,李加梅,张永芳,胡雅儿. 上海交通大学学报(医学版). 2016(05)
[7]糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α调控机制研究[J]. 吕翠岩,张胜容,赵文景,张竹华,蔡朕,郑桂敏,孟元,赵静,王晖,陈洋子,刘铜华. 中华中医药学刊. 2016(02)
[8]甘丙肽及受体1在神经病理性痛大鼠伏核的镇痛作用及对ERK1/2信号通路的调节研究[J]. 徐焕焕,张颖,李霞,陈静,徐世莲. 中国病理生理杂志. 2015(10)
[9]静脉注射免疫球蛋白对神经病理性疼痛大鼠的治疗作用[J]. 王立凤,张志宇,李真真,梁映霞. 中国临床药理学与治疗学. 2015(08)
[10]P300与CREB结合蛋白在神经病理性痛形成过程中的表达及分布[J]. 武干生,吴树彪,胡盼盼,董铁立. 中华实验外科杂志. 2015 (04)
本文编号：3615586
【文章来源】：中国现代医生. 2019,57(20)
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
各组NP大鼠P300、Ac-H3蛋白表达表3各组NP大鼠P300mRNA和蛋白、Ac-H3蛋白相对表达水平
中国现代医生2019年7月第57卷第20期CHINAMODERNDOCTORVol.57No.20July2019·基础医学·图2各组NP大鼠HIF-1α/VEGF、ERK通路相关蛋白表达中枢敏化，并可采用机械痛阈、热痛阈检测疼痛行为，且具有操作简单、创伤性小等优点[10]。因此，本研究通过构建CCI模型进一步探究NP有效治疗方法及其可能作用机制，为提高NP治疗效果提供一定理论依据。P300属于组蛋白乙酰转移酶且具有辅助激活因子作用，组蛋白去乙酰化酶可对NP发挥镇痛作用，进一步研究显示大鼠脊髓中P300表达水平升高并可促进NP发生[11-12]，但关于其具体作用机制及可能作用通路尚未解释清楚。研究显示在SNL大鼠模型鞘内注射P300抑制剂可能通过抑制P300介导p65乙酰化并促使核因子κB（NF-κB）表达水平降低，这可为神经疼痛的治疗提供靶点[13]。本研究构建CCI模型并采用siRNA-P300鞘内注射观察大鼠机械痛阈及热痛阈变化，结果显示术后不同时间点各组NP大鼠机械痛阈及热痛阈均明显降低，提示NP模型大鼠造模成功。术后5d、14dsiRNA-P300组NP大鼠机械痛阈及热痛阈均明显高于模型组、阴性对照组，说明鞘内注射P300的siRNA可有效提高NP大鼠痛阈，提示P300在NP发生过程中发挥重要作用。本研究结果显示模型组、阴性对照组及siRNA-P300组NP大鼠P300mRNA、蛋白及Ac-H3蛋白表达水平均显著高于假手术组，siRNA-P300组显著低于模型组，其中组蛋白Ac-H3属于P300乙酰化作用底物[14]，分析原因可能为siRNA-P300可通过抑制脊髓P300表达并减弱P300介导的组蛋白乙酰化作用进而抑制下游疼痛基因表达。提示siRNA-P300鞘内注射可提高NP大鼠痛阈。神经免疫系统紊乱及炎症介质异常分泌可引发NP，因而探讨siRNA-P300鞘内注射对NP大鼠体内炎性介质的影响具有重要意义[15]。?
【参考文献】：
期刊论文
[1]加味当归芍药散抑制组蛋白乙酰化酶p300/血清环加氧酶-2通路调控核因子E2相关因子2在黄褐斑形成中的作用机制研究[J]. 李燕红,杨谦,李锦亮,庄锦填,李振洁,钟金宝. 山西医药杂志. 2017(24)
[2]神经病理性疼痛大鼠模型接受免疫球蛋白干预后疼痛程度及神经炎症反应程度的分析[J]. 鲁智生,周江平,刘禹利,石学银. 海南医学院学报. 2017(07)
[3]神经鞘内转染siRNA-p300对大鼠神经病理痛阈值的影响[J]. 王鹏,郝伟,张颖,任立洁,张艳莉,单世民. 中国中西医结合外科杂志. 2016(05)
[4]慢性压迫损伤性神经病理性疼痛大鼠模型中脊髓背角ERK、CREB、BDNF表达的变化[J]. 徐良,裘涛,张丽娟,张伟骏. 浙江医学. 2016(16)
[5]鞘内注射乙酰化酶p300抑制剂Garcinol对大鼠神经病理性痛的影响[J]. 王依慰,刘清珍,陈春龙,支亦博,章洁,李伟彦. 临床麻醉学杂志. 2016(06)
[6]ERK/CREB信号通路在异菝葜皂苷元促进Aβ损伤SH-SY5Y细胞BDNF表达中的作用[J]. 张瑞,夏志明,孙小余,李加梅,张永芳,胡雅儿. 上海交通大学学报(医学版). 2016(05)
[7]糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α调控机制研究[J]. 吕翠岩,张胜容,赵文景,张竹华,蔡朕,郑桂敏,孟元,赵静,王晖,陈洋子,刘铜华. 中华中医药学刊. 2016(02)
[8]甘丙肽及受体1在神经病理性痛大鼠伏核的镇痛作用及对ERK1/2信号通路的调节研究[J]. 徐焕焕,张颖,李霞,陈静,徐世莲. 中国病理生理杂志. 2015(10)
[9]静脉注射免疫球蛋白对神经病理性疼痛大鼠的治疗作用[J]. 王立凤,张志宇,李真真,梁映霞. 中国临床药理学与治疗学. 2015(08)
[10]P300与CREB结合蛋白在神经病理性痛形成过程中的表达及分布[J]. 武干生,吴树彪,胡盼盼,董铁立. 中华实验外科杂志. 2015 (04)
本文编号：3615586
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