PSGL-1交联对αLβ2整合素介导的白细胞粘附的作用和机制初步研究
本文关键词:PSGL-1交联对αLβ2整合素介导的白细胞粘附的作用和机制初步研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:炎症是一种十分常见且重要的病理过程,它是具有血管系统的活体组织对致炎因子发生的防御性的反应,炎症反应失调会给机体带来很多负面影响。炎症过程中,白细胞要从血液中被募集到炎症部位发挥生物学效应。这个过程受到表达于白细胞和血管内皮细胞表面的各种粘附分子的调控。白细胞的滚动过程(即起始粘附)是由选择素和它的配体相互作用介导的,这种相互作用产生的信号可以协同趋化因子信号调控整合素的活化,活化的整合素与配体相互作用,能够使白细胞在血管内皮上的滚动速度变慢并粘附到血管内皮上,最终跨越血管内皮和胞外基质到达炎症部位。 PSGL-1作为选择素的重要配体,组成性表达于多种白细胞表面。本实验中,,我们通过静止粘附实验发现PSGL-1交联引起Jurkat细胞在Fibrinogen上的粘附,并且通过流式和免疫荧光实验证明了PSGL-1交联能够诱导Jurkat细胞表面αLβ2整合素发生簇集。通过细胞膜成分的分离以及特异性破坏脂筏的药物MβCD处理细胞进一步研究发现,PSGL-1交联引起Jurkat细胞粘附这一生理事件,依赖于脂筏结构的完整性及Syk激酶的活性。本研究结果为进一步探讨白细胞起始粘附向稳定粘附转变奠定了一定的基础。
【关键词】:白细胞粘附 αLβ2整合素 脂筏 Syk激酶
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R363
【目录】:
- 摘要4-5
- Abstract5-6
- 目录6-8
- 引言8-21
- 一、 白细胞的粘附和迁移9-11
- (一) 白细胞的粘附9-10
- (二) 白细胞的迁移10-11
- 二、 选择素概述11-12
- (一) 选择素的种类及结构11-12
- (二) 选择素的配体12
- 三、 PSGL-1 概述12-14
- (一) PSGL-1 的结构12-13
- (二) PSGL-1 介导的信号途径13-14
- 四、 整合素概述14-16
- (一) 整合素的种类及结构14-15
- (二) 整合素的配体与活化15-16
- (三) 白细胞中表达的整合素及β2 整合素的作用16
- 五、 脂筏概述16-18
- (一) 脂筏的结构16-17
- (二) 脂筏与细胞信号转导17-18
- 六、 Syk 概述18-20
- (一) Syk 的结构18-19
- (二) Syk 的活化19-20
- (三) Syk 的功能20
- 七、 本论文的研究意义20-21
- 材料与方法21-26
- 一、 实验材料21-23
- (一) 细胞21
- (二) 抗体21
- (三) 试剂21
- (四) 主要溶液21-22
- (五) 主要仪器设备22-23
- 二、 实验方法23-26
- (一) 细胞的培养基冻存23
- (二) 中性粒细胞的提取23
- (三) Jurkat 细胞的静止粘附实验23
- (四) 免疫荧光及流式细胞仪分析23-24
- (五) 细胞亚组分的分离提取24
- (六) 蛋白质电泳及免疫印迹24-26
- 结果与分析26-31
- 一、 PSGL-1 交联介导了 LFA-1 依赖的 Jurkat 细胞在 Fibrinogen 上的粘附过程26-27
- 二、 PSGL-1 交联引起了细胞表面αLβ2 整合素的簇集27-28
- 三、 Syk 参与了αLβ2 整合素依赖的 Jurkat 的粘附且依赖脂筏结构的完整性28-29
- 四、 Syk 激酶影响了 KPL 刺激引起的 Jurkat 细胞表面αLβ2 整合素的簇集29-31
- 讨论31-33
- 一、 Syk 参与了 PSGL-1 交联引起的αLβ2 介导的 Jurkat 细胞在 Fibrinogen 上的粘附31-32
- 二、 PSGL-1 交联引起的 Jurkat 细胞在 Fibrinogen 上的粘附依赖脂筏结构的完整性32-33
- 结论33-34
- 参考文献34-40
- 致谢40
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本文编号:415463
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