小鼠心肌微血管内皮细胞的原代培养及鉴定

发布时间：2017-06-15 08:03

  本文关键词：小鼠心肌微血管内皮细胞的原代培养及鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的建立一种小鼠心肌微血管内皮细胞体外培养体系。方法无菌环境下取出3~4周大小的C 57小鼠心脏,并去除左右心房、瓣膜组织和结缔组织,将余下的心肌组织用70%的酒精浸泡15s,PBS清洗干净后滴加少量胎牛血清并尽量剪碎心肌组织,将剪碎后的组织块均匀接种到1%明胶包被的6孔板内,内皮细胞专用培养基培养,倒置显微镜观察细胞生长形态,vWF相关抗原进行免疫荧光鉴定。结果贴壁后的组织块于24小时左右开始长出细胞,大约1周后细胞汇合呈铺路石样。传代后小鼠心肌微血管内皮细胞的生长曲线近似"S"形,第1、2天生长速度缓慢,第3、4天生长速度增快,进入指数增生期,第5~7天时达到汇合状态,呈铺路石样。免疫荧光鉴定vWF相关抗原阳性表达,并且分离得到的小鼠心肌微血管内皮细胞在体外具有血管生成能力。结论组织块贴壁法培养小鼠心肌微血管内皮细胞操作简单,易于掌握,并且细胞获得率大,纯度高,为微血管病变的研究提供了实验模型。
【作者单位】： 四川医科大学附属医院心内科;川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院心内科;
【关键词】： 小鼠 心肌微血管内皮细胞 原代培养
【基金】：四川省科技厅课题(2013JY0129)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 微血管内皮细胞不仅构成了血液与组织间的重要屏障,参与物质交换,同时微血管内皮细胞还具有合成、分泌和降解生物活性物质的功能[1]。在对内皮细胞的不断研究中,发现微血管内皮细胞的功能损害是糖尿病[2]、感染[3]、纤维化[4]、休克及肿瘤等多种疾病的病理基础[5]。微血管内皮

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本文编号：451846