人诱导性多潜能干细胞系的建立

发布时间：2017-06-17 10:07

  本文关键词：人诱导性多潜能干细胞系的建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:诱导性多潜能干细胞与肿瘤干细胞的发生过程极其相似,而且具有的干细胞特性极其接近人胚胎干细胞。因此,研究诱导性多潜能干细胞有利于人们进一步认识并了解人类发育以及肿瘤的发生过程。目的:掌握建立人诱导性多潜能干细胞系的技术,以便为特异性疾病细胞的重编程建立技术平台,从而利用重编程技术研究疾病的发病机制。方法:将含有Oct4、Sox2、Klf-4和c-Myc 4个转录因子的反转录病毒感染人皮肤成纤维细胞(HS27细胞),在人胚胎干细胞培养条件下诱导产生人胚胎干细胞样的克隆。挑取并进一步扩增,通过克隆形态、碱性磷酸酶活性、免疫荧光检测是否有人胚胎干细胞标记物Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4的表达,悬滴法检测HS27细胞来源的克隆形成畸胎瘤的能力和验证向3个胚层的分化能力。结果与结论:经病毒感染诱导产生的胚胎干细胞样克隆呈绿色荧光蛋白阴性,克隆在细胞形态方面与人胚胎干细胞克隆相似,进一步扩增经碱性磷酸酶检测克隆呈阳性,免疫荧光检测克隆表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf-4,并且HS27细胞来源的克隆注入免疫缺陷小鼠体内可以形成畸胎瘤并经苏木精-伊红染色显示具有向三胚层分化能力。实验成功构建了人诱导性多潜能干细胞系,为下一步开展疾病细胞特异性重编程研究奠定了良好的实验基础。
【作者单位】： 内蒙古医科大学附属医院检验科;内蒙古医科大学基础医学院病理解剖教研室;
【关键词】： 诱导多功能干细胞 胚胎干细胞 畸胎瘤 干细胞 培养 人诱导性多潜能干细胞 人胚胎干细胞 三胚层分化 Oct Sox c-Myc Klf-
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 文章亮点:1诱导性多潜能干细胞是将不可逆的终末分化细胞转变为具有永生化、无限分化能力的类胚胎干细胞。这一特点,与肿瘤细胞的发生过程极其相似,因此通过研究诱导性多潜能干细胞,可以为肿瘤基础研究和临床诊断与治疗提供一种新的解决途径。2实验将携带4种基因的反转录病毒

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本文编号：458034