体外谱系选择法诱导胚胎干细胞神经分化特性的研究

发布时间：2017-06-19 18:03

  本文关键词：体外谱系选择法诱导胚胎干细胞神经分化特性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究体外谱系选择法诱导胚胎干细胞(ES)神经分化的特点,建立ES细胞体外神经分化的模型。方法通过悬滴和悬浮培养、Nestin阳性筛选培养、神经样细胞增殖培养以及神经细胞分化培养的方法,建立体外诱导未分化的ES细胞分化为多巴胺能神经元模型;观察各神经分化及各阶段的ES细胞形态,并通过RT-PCR以及荧光免疫化学方法检测各分化阶段ES细胞神经特异表达基因和蛋白的表达特点;通过高效液相检测各阶段分化细胞分泌神经递质多巴胺的能力。结果随着分化培养阶段的延长,分化的ES细胞中可见大量神经样细胞出现,分化末期可见清晰的神经元结构(包括突触);分化早期,仅有部分神经细胞特异基因和蛋白表达,且表达水平低,随着培养阶段延长,特异基因和蛋白均表达,且表达水平明显增加;神经递质多巴胺的水平在未分化和分化早期细胞中未检出,分化的中后期可检测出并呈现随分化时间延长而增加的趋势。结论建立的体外谱系选择培养方法可诱导ES细胞分化获得具有多巴胺能神经元特性的细胞,可为神经发育毒性研究提供模型。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心;国家食品安全风险评估中心 卫生部风险评估重点实验室;
【关键词】： 胚胎干细胞 谱系选择法 神经分化 体外试验 毒理
【基金】：国家自然科学基金青年基金项目(81102134) 转基因生物新品种培育重大专项(2012ZX08011001)
【分类号】：R321
【正文快照】： 卫生部风险评估重点实验室,北京100022)神经系统发育成熟需要一个相当长的时间,且具有高度的时间性和区域性特点,所以这一时期是神经系统对神经毒物的高敏感期,任何外来因素对神经系统发育过程的干扰都可能造成永久性的损伤[1],因此在进行神经发育毒性作用机制研究时,一个能真

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 刘海波;支媛;冯永全;戴抒豪;于洲;;以ITSFn诱导法为基础的神经发育毒性评价模型的建立及其有效性研究[J];中国食品卫生杂志;2013年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张建;顾茵;罗学胜;杨忠;李红丽;蔡文琴;;氯化锂通过激活Wnt信号通路促进神经干细胞增殖[J];济宁医学院学报;2013年06期

2 刘晓东;张夏南;郝宁;鞠前前;秦建兵;田美玲;金国华;吕广明;;雌二醇对大鼠海马神经干细胞增殖的影响[J];解剖学报;2014年05期

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 窦婷婷;百草枯对人胚胎神经干细胞氧化损伤机制的研究[D];复旦大学;2013年

2 李冲;高氟对体外培养SD大鼠大脑皮质神经细胞毒性研究[D];河南科技学院;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 于洲;徐海滨;;体外诱导胚胎干细胞分化为神经细胞特性的实验研究[J];卫生研究;2010年05期

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本文编号：463282