shRNA抑制survivin基因表达对脐静脉血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

发布时间：2017-06-22 20:19

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【摘要】：目的研究靶向存活素(survivin)的短发夹RNA真核表达质粒(shRNA)对脐静脉血管内皮细胞增殖与凋亡的影响。方法合成靶向survivin的shRNA真核表达质粒及阴性对照质粒,用脂质体法将质粒转染至经VEGF(50ng/mL)处理的HUVEC细胞;转染48h后,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测HUVEC中survivin的mRNA表达及蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;TUNEL法检测细胞凋亡。结果(1)survivin-shRNA质粒试验组与阴性对照shRNA质粒组及空白对照组比较,转染48h后人脐静脉血管内皮细胞survivin的mRNA及蛋白表达水平明显下降(P0.05)。(2)与阴性对照shRNA组及空白对照组比较,转染后的人脐静脉血管内皮细胞增殖能力明显下降。转染后24、48、72h生长抑制率分别为(13.53±3.91)%、(38.97±1.82)%、(65.75±1.83)%,于转染后72h最为显著。(3)试验组凋亡率为(28.07±1.71)%,较阴性对照组(11.45±1.52)%和空白对照组(10.04±1.46)%显著增高(P0.05)。结论靶向survivin的shRNA质粒能通过下调survivin表达,进而抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖并促进其凋亡。
【作者单位】： 云南省第一人民医院风湿免疫科;
【关键词】： 血管内皮生长因子 存活素 shRNA 增殖 细胞凋亡
【基金】：云南省科技厅昆明医科大学联合专项基金资助项目(2011FB215)
【分类号】：R329.2;Q78
【正文快照】： 存活素(survivin)是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosisof protein,IAP)家族成员,是具有强大抗凋亡效应的蛋白[1]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEFG)可诱导survivin抗凋亡蛋白的表达,抑制内皮细胞凋亡,促进血管生成[2]。深入认识和揭示survivin在

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本文编号：473016