devR基因调控的结核分枝杆菌细胞毒性的研究

发布时间：2017-06-24 14:08

  本文关键词：devR基因调控的结核分枝杆菌细胞毒性的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的阐明dev R基因表达对分枝杆菌生长及感染能力的影响。方法确认野生型牛分支杆菌卡介苗(M.bovis BCG,简称BCG)、dev R基因敲除的BCG菌株(简称Δdev R)和dev R基因回补的BCG菌株(简称dev R.com)的dev R序列正确;在不同时间点测定600 nm下的吸光度(A)值,绘制3种细菌的生长曲线;以感染复数(MOI)=10感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549(简称A549细胞)和小鼠巨噬细胞Raw264.7(简称Raw264.7细胞),分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验于0、24、48、72 h测定细胞凋亡率和乳酸脱氢酶(LDH)释放水平;采用实时定量PCR(RT-PCR)测定凋亡相关基因bcl-2和bad的表达水平。结果Δdev R菌株在早期(培养2~10 d)生长较BCG菌株和dev R.com菌株明显加快(P0.01)。Δdev R菌株感染A549细胞和Raw264.7细胞后,细胞的凋亡和坏死效应明显增加,与BCG菌株和dev R.com菌株比较差异有统计学意义(P0.05)。3种菌株感染A549细胞均导致凋亡相关基因bcl-2表达上调,且Δdev R菌株感染组bcl-2基因表达明显高于BCG和dev R.com菌株感染组;3种菌株感染Raw264.7细胞均导致凋亡相关基因bad表达上调,且Δdev R菌株感染组bad基因表达明显高于BCG和dev R.com菌株感染组。结论 dev R基因敲除的BCG菌株毒力明显增强。
【作者单位】： 第四军医大学西京医院检验科;
【关键词】： devR基因 卡介苗 感染 凋亡 乳酸脱氢酶
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81371857)
【分类号】：R378.911
【正文快照】： 结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的危害全球公众健康的重要传染性疾病。根据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)的最新报告,2012年全球约有860万人患结核病,死亡人数约为130万。在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染人群

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