微小RNA-27b过表达对残粒脂蛋白诱导的小鼠内皮祖细胞衰老的影响

发布时间：2017-06-26 11:02

  本文关键词：微小RNA-27b过表达对残粒脂蛋白诱导的小鼠内皮祖细胞衰老的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞,有保持血管内皮细胞完整和维持正常血管内皮功能的作用。EPCs的衰老和数量减少与冠心病等缺血性心脑血管疾病的发生和发展密切相关。p16INK4α是调控干/祖细胞衰老的重要转录因子。餐后高甘油三酯血症患者血浆中的残粒脂蛋白(remnant-like particles, RLPs)能够诱导人外周血来源的EPCs衰老,剂量依赖性地上调p16INK4α的蛋白水平。微小RNA(microRNA,miRNA/miR)是一类高度保守的、由18～22个核苷酸构成的非编码单链RNA,在转录后水平负向调控靶基因的表达。已知人RLPs可促进小鼠EPCs的衰老,伴miR-27b表达显著下调。由此推测miR-27b可能参与调控RLPs诱导的小鼠EPCs衰老。 目的用miR-27b模拟物(mimic)转染小鼠骨髓来源EPCs,观察niR-27b过表达对RLPs诱导的EPCs衰老过程的影响。 方法密度梯度离心法提取小鼠双下肢骨髓单个核细胞,4天后弃去未贴壁细胞。用EBM-2完全培养基培养至第7天后,将细胞分为miR-27b过表达组和对照组,分别转染miR-27b mimic及其对照物,24h后用0.2mg/mL的RLPs同时干预两组细胞。24h后行衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescense associated-β-galactosidase,SA-β-Gal)染色、分别计数两组衰老细胞百分率；提取总RNA,测定两组细胞中miR-27b、衰老相关基因p16INK4α的mRNA水平。 结果成功分离培养出小鼠骨髓源性EPCs,使miR-27b在EPCs中表达水平显著上调37倍。miR-27b过表达组的衰老细胞百分率为29.4%,对照组为21.4%。miR-27b过表达组的衰老相关基因p16INK4α的mRNA水平低于对照组,但无统计学显著性。 结论miR-27b过表达可能对RLPs诱导的小鼠骨髓源性EPCs衰老起负性调节作用,但机制还需要进一步探讨。
【关键词】：miR-27b 内皮祖细胞衰老 p16~(INK4α)
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• ~.略语10-11
• 第一章 前言11-12
• 第二章 材料与方法12-25
• 2.1 材料12-14
• 2.2 方法14-25
• 第三章 结果25-29
• 3.1 小鼠EPCs体外培养和鉴定25-27
• 3.2 MiR-27b在EPCs中过表达27
• 3.3 MiR-27b过表达可抑制RLPs诱导的EPCs衰老27-28
• 3.4 MiR-27b过表达对衰老相关基因mRNA表达的影响28-29
• 第四章 讨论29-33
• 第五章 结论33-34
• 参考文献34-39
• 综述39-52
• 参考文献45-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 周晓峰;王佐;;内皮祖细胞在动脉粥样硬化进程中的作用[J];中国动脉硬化杂志;2007年12期

2 李美玲;刘凤姣;刘玲;;小鼠骨髓源性内皮祖细胞的分离培养与鉴定[J];中国动脉硬化杂志;2011年06期

3 寇恂;曾春雨;;微小RNA在心血管疾病发生中的作用研究进展[J];中华高血压杂志;2011年08期

  本文关键词：微小RNA-27b过表达对残粒脂蛋白诱导的小鼠内皮祖细胞衰老的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：485855