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法氏囊活性五肽BP5的抗肿瘤作用

发布时间:2017-06-27 22:11

  本文关键词:法氏囊活性五肽BP5的抗肿瘤作用,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:【目的】法氏囊活性五肽Bursopentin(BP5)是一种多功能生物学活性因子,不仅具有免疫调节和抗氧化功能,还具有抗肿瘤活性。目前,BP5发挥抗肿瘤生物功能的作用机制尚不清晰。【方法】本研究利用T7噬菌体展示技术构建鸡DT40细胞T7噬菌体c DNA文库,以BP5-BSA为靶分子对文库进行亲和淘选,通过序列测定和生物信息学分析,获得BP5的结合蛋白。通过分析BP5诱导的鸡DT40细胞mRNA基因表达谱和检测BP5对HCT116细胞中p53 Luciferase活性和p53信号通路中相关蛋白表达的影响来探讨BP5抗肿瘤的作用机制。【结果】构建的鸡DT40细胞T7噬菌体c DNA文库原始滴度为1.2×104pfu/m L,重组率为91.7%,扩增后滴度为1.9×109pfu/m L;通过生物淘选获得3条与BP5结合的鸡源蛋白血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和运输蛋白颗粒复合体2(trafficking protein particle complex 2)。基因表达谱分析结果显示,BP5参与调节多条与抗肿瘤功能有关的通路,其中包括p53信号通路,且p53信号通路涉及的5个差异表达基因均与细胞周期调控或抗肿瘤相关,其中SIAH1、TP53(p53)、CIP1(p21)基因被上调,CHEK2、CCNE1基因被下调。RT-PCR方法检测10个表达水平有明显变化的差异基因,其结果与基因芯片分析结果相符;BP5对p53 Luciferase活性的影响实验结果显示,BP5在0.2-20μg/m L浓度下能够明显提高HCT116细胞中p53相对Luciferase活性,Western blotting结果证实,BP5能显著促进p53、p21蛋白的表达水平,而CCNE1和CHEK2蛋白的表达水平则明显降低。【结论】本研究结果表明BP5通过p53信号通路途径发挥其抗肿瘤生物学功能,为进一步研究BP5抗肿瘤具体的分子机制提供了参考依据。
【作者单位】: 河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室;南京农业大学农业部动物细菌学重点实验室;
【关键词】Bursopentin(BP) 鸡DT细胞 T噬菌体c DNA文库 相互作用蛋白 p信号通路 抗肿瘤
【基金】:国家自然科学青年基金(31101792和31201928) 河南省高校青年骨干教师项目(2012GGJS-077)~~
【分类号】:R392
【正文快照】: 法氏囊(bursa of Fabricus,BF)是具有与胸腺相同地位的体液中枢器官,是禽类特有的免疫器官。禽类前体B细胞从骨髓迁移到BF,并在BF中分化、发育为成熟的B细胞,然后通过淋巴循环和血液循环迁移到外周淋巴器官参与免疫反应[1]。已证实,BF组织中存在多种生物活性物质,囊素三肽(bur

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本文编号:491426

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