β-神经生长因子基因转染对人脐静脉内皮细胞功能的影响

发布时间：2017-06-29 08:10

  本文关键词：β-神经生长因子基因转染对人脐静脉内皮细胞功能的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究β-神经生长因子(β-NGF)基因转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对细胞增殖、单克隆形成、细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移相关功能的影响。方法将人源β-NGF基因重组的真核表达质粒(p EGFP-N1/β-NGF)转染至HUVEC,同时设置p EGFP-N1空载组、正常组(未转染质粒)、酪氨酸激酶受体A(Trk A)抑制剂组(β-NGF基因转染组加入1∶1000的K252a)。观察转染前后细胞形态学变化,利用real-time PCR和Western blot检测β-NGF基因转染表达效果,MTT法检测β-NGF基因转染对细胞增殖的影响,平板单克隆实验检测β-NGF基因转染对细胞单克隆形成能力的变化,流式细胞术检测β-NGF基因转染对细胞周期和细胞凋亡率的影响,Transwell方法检测转染前后细胞迁移能力的变化,Western blot检测β-NGF基因转染前后Trk A和血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化。结果β-NGF基因成功转染HUVEC 48 h后能够显著提高β-NGF mRNA和蛋白的表达水平(P0.05),同时促进细胞增殖、单克隆形成、细胞迁移能力,并影响细胞周期抑制细胞凋亡率(P0.05)。β-NGF基因转染HUVEC后Trk A和VEGF表达水平也随之显著上升(P0.05),但受到Trk A抑制剂的抑制。结论β-NGF基因能够成功转染HUVEC并显著表达,进而促进细胞增殖、单克隆形成、细胞迁移能力,并影响细胞周期抑制细胞凋亡率,而其发挥作用与Trk A结合诱导VEGF表达上调有关。
【作者单位】： 三峡大学人民医院心血管内科;三峡大学附属第一人民医院心血管内科;
【关键词】： 内皮细胞 β-神经生长因子 基因转染 细胞增殖 细胞迁移
【基金】：国家自然科学基金资助(81270280)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是目前最先发现且研究较为清楚的一个神经营养因子,而β-NGF是其中具有生物活性的亚基成分[1]。近来研究发现β-NGF可以在体外作用于血管内皮促进血管新生,表明其在血管损伤修复中发挥积极作用[2]。王中京等[3]构建β-NGF腺病毒转染,发

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 王向鹏;杨智勇;王廷华;王进昆;;神经生长因子和脑源性神经营养因子在脑胶质瘤内的表达[J];国际神经病学神经外科学杂志;2006年02期

2 范书霞;韩战营;邱春光;;血管外膜原位干/祖细胞研究现状及进展[J];中国动脉硬化杂志;2013年08期

3 李甫强,王廷华,董坚,梅妍,周鸿鹰,项涛,羊惠君;人β-神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定[J];四川解剖学杂志;2005年01期

4 王雯霞;胡新央;谢小洁;刘先宝;王建安;;神经生长因子促进骨髓间充质干细胞血管新生能力[J];上海医学;2011年01期

5 齐岩梅;韩雅玲;康建;李娜;田孝祥;闫承慧;;神经生长因子对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响及TrkA的关键作用[J];心脏杂志;2009年01期

6 王中京;赵n\;丁胜;毛红;牛力;孙敏娴;;β-神经生长因子转染的大鼠内皮祖细胞分化功能的变化[J];中国糖尿病杂志;2013年09期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 牛云;何旭;王心蕊;马英智;李玉林;;鼠胶质瘤细胞上清液诱导人骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化[J];吉林大学学报(医学版);2007年04期

2 宋默;王洪江;;神经生长因子及其受体在肿瘤研究中的进展[J];大连医科大学学报;2010年02期

3 邹新辉;陈兵;;骨髓间充质干细胞在体外向神经元样细胞分化的研究进展[J];广东医学院学报;2010年06期

4 李俊彦;刘俊;孙杰;;人脑胶质瘤中proNGF凋亡前信号的研究[J];昆明医学院学报;2011年08期

5 章隽宇;严晓华;吴小平;;NGF受体TrkA与TGF-β受体相互作用[J];南昌大学学报(理科版);2011年02期

6 陆新宇;陆培松;李巧玉;杨勇;;人脑胶质瘤中神经生长因子表达与组织病理分级及预后的关系[J];中华实用诊断与治疗杂志;2012年10期

7 王中京;丁胜;赵n\;毛红;孙敏娴;王利;;β神经生长因子对内皮祖细胞一氧化氮合酶的影响[J];武汉大学学报(医学版);2015年01期

8 赵彬;王焕林;高志勤;;血管内皮细胞生长因子与抑郁症相关性的临床研究现状[J];临床精神医学杂志;2014年06期

9 王刚;周敬群;;β-NGF减轻H_2O_2对HUVECs的损伤[J];基础医学与临床;2015年02期

10 董海蓉;丁海霞;华烨;丁新生;;脑源性神经营养因子促进人脑胶质瘤细胞株生长的研究[J];中华肿瘤防治杂志;2009年20期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 李巧玉;神经生长因子在人脑胶质瘤中的表达特点及其临床意义[D];江苏大学;2011年

2 张克兰;BDNF，TrkB在原发性癌中的表达及BDNF对肝癌细胞系Bel-7402的作用[D];中南大学;2010年

3 刘莉;几种小分子对NGF诱导的PC12细胞轴突生长作用的研究[D];西北农林科技大学;2012年

4 曾文;神经支配的小口径组织工程血管体内构建[D];第三军医大学;2013年

5 李坑;三氧化二砷对急性哮喘小鼠CD4~+T细胞凋亡的影响及机制研究[D];中南大学;2013年

6 徐孙兵;胰腺癌嗜神经转移的机制研究：TGF-β1/ALK5信号通路对NGF表达的影响[D];浙江大学;2013年

7 王志红;NapFFGRGD表面改性PCL材料及改性后材料作为小口径血管的研究[D];南开大学;2013年

8 郑玉蓉;胶原/壳聚糖—明胶微球支架缓释三七皂甙Rg1促血管化研究[D];浙江大学;2014年

9 王文斌;MiR-150对内皮祖细胞促深静脉血栓溶解再通作用的研究[D];苏州大学;2014年

10 肖炜明;汉黄芩素对胃癌生长及细胞免疫功能影响的研究[D];扬州大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘辉;神经生长因子及其受体在肝癌组织中的表达及其意义[D];华中科技大学;2011年

2 石庆秋;广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子的分离纯化及NGF基因的真核表达[D];广西医科大学;2008年

3 杨勇;NGF在人脑胶质瘤中的亚细胞定位及其在胶质瘤诊断和靶向治疗中的应用[D];江苏大学;2009年

4 何伟;体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞方向分化的研究[D];江苏大学;2009年

5 杜宝顺;胶质瘤中NGF、TrkA的表达及作用机制[D];新乡医学院;2009年

6 张铁军;腺病毒介导的ING4及IL-24基因对人脑胶质瘤细胞抑制生长和侵袭迁移及其机制的实验研究[D];江苏大学;2010年

7 柳岩;鹿茸多肽对骨髓间充质干细胞向神经元样细胞转化的促诱导作用[D];长春中医药大学;2010年

8 蒋航;有氧运动对老年大鼠骨骼肌VEGF和bFGF表达的影响[D];北京体育大学;2013年

9 孟召友;A20人工锌指转录因子真核载体的构建及其对内皮细胞炎症反应的影响及其机制的研究[D];第三军医大学;2013年

10 王川;钌配合物、多钼氧酸盐纳米晶抗肿瘤血管新生及其作为AD抑制剂的研究[D];暨南大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 朱斌;柳茵;刘维军;李琳;;转化生长因子-β1在心血管病中的研究进展[J];中国循证心血管医学杂志;2011年01期

2 张虹;范婷婷;;脑源性神经营养因子与临床疾病的新进展[J];上海医学;2007年11期

3 赵琦;朴海南;李婉秋;;干细胞与动脉粥样硬化[J];中国循证心血管医学杂志;2012年06期

4 郭宏;宋霞;马秋霞;;骨髓间充质干细胞改善心肌梗死后心功能的机制和诱导因素[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年08期

5 周建良;邹明晖;陈义初;周诚;史嘉玮;董念国;;人脐带血内皮祖细胞与血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共培养及其增殖和迁移能力[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年06期

6 齐岩梅;韩雅玲;康建;李娜;田孝祥;闫承慧;;神经生长因子对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响及TrkA的关键作用[J];心脏杂志;2009年01期

7 程千鹏;吕肖锋;;内皮祖细胞与PI3K/Akt信号传导通路[J];心血管病学进展;2009年S1期

8 武钧;李建芳;瞿颖;陈雪华;汤耀卿;;小鼠骨髓来源内皮祖细胞体外诱导培养及分化特征[J];中国病理生理杂志;2011年06期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈红;段建钢;;神经干细胞分化的基因决定及基因工程化神经干细胞的应用前景[J];四川解剖学杂志;2007年01期

2 蒲晓允,张春雷,邓均,李召权,黄辉;诱导型一氧化氮合酶基因在3T3细胞中的转染和鉴定[J];医学研究生学报;2004年06期

3 杜鹏;王春雷;徐运兰;喻志源;谢敏杰;王伟;;运用电穿孔技术建立小鼠脑内基因转染模型[J];华中科技大学学报(医学版);2007年04期

4 刘爱平;许红梅;;超声微泡破碎技术与基因转染研究进展[J];检验医学与临床;2008年07期

5 周文武;胡建国;马燕琳;林玲;杨进福;唐滔;;人VEGF基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究[J];生命科学研究;2005年04期

6 储庆;吴织芬;王勤涛;何海丽;万玲;刘玲侠;;人转化生长因子-β1基因转染对人牙龈成纤维细胞成骨特性的影响[J];华西口腔医学杂志;2009年03期

7 顾瑛,刘凡光,江亿平,朱建国,李峻亨;弱激光对脂质体介导的血管平滑肌细胞基因转染的影响[J];激光生物学报;1999年02期

8 沈慧玲,陈子兴,王玮,段卫明,傅建新;电穿孔法基因转染悬浮细胞条件的优化[J];苏州大学学报(医学版);2004年01期

9 陈海靓;吴伟;梁文权;;脂质组分对阳离子脂质体介导的基因转染的影响[J];中国药学杂志;2006年03期

10 林霞;何晓晓;王柯敏;谭蔚泓;;基于二氧化硅微颗粒促细胞增殖效应的基因转染新方法[J];化学学报;2007年14期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 沈慧玲;陈子兴;王玮;傅建新;;WT1基因异构体的转导及永久表达细胞株的建立[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年

2 刘春喜;余汪洋;邹伟伟;张娜;;新型阳离子脂质LHLN促进基因转染的研究[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年

3 张华利;轩东英;李鑫;金岩;;新基因mcpr-1的cDNA克隆、鉴定及其对EPMC增殖的影响[A];中华口腔医学会第七届全国口腔病理学术会议论文摘要汇编[C];2006年

4 逄越;袁晓东;汤敏谦;李庆伟;;鸡卵清蛋白基因序列调控人α1抗胰蛋白酶基因在CHO细胞中的表达[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年

5 杨立群;邓宇斌;蓝育青;杨彬;刘珍珍;梁玄;张黎明;周艳芳;任先越;宫海军;曾睿;;阳离子超支化多糖衍生物的合成及其在基因转染中的研究[A];2013年全国高分子学术论文报告会论文摘要集——主题I：生物高分子与天然高分子[C];2013年

6 芦玲巧;于刚刚;张冬梅;曾翔俊;张立克;;CYP2J3基因转染对在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

7 李泉;邱必军;张金e，

本文编号：497143