预制神经对脊髓前角运动神经元影响的观察

发布时间：2017-06-30 00:12

  本文关键词：预制神经对脊髓前角运动神经元影响的观察，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：本实验通过建立新西兰大白兔动物模型,使用静脉桥接胫神经及腓总神经神经来预制一种神经管道,分为空白对照组,神经外膜开窗组,神经束部分切断植入组来对比观察使用不同的方法预制神经后的不同阶段,脊髓前角运动神经元的功能及超微结构的变化。 方法：1.选择清洁级未交配成年新西兰大白兔30只,雌雄不限,随机分为空白对照组10只,神经外膜开窗组10只,神经束部分切断植入组10只。其中实验组术后取材时间的不同,分别在术后3天、7天、28天三个时间段分为亚组。 2.耳缘静脉注射麻醉后腓骨小头以上lcm处用显微刀于胫神经及腓总神经侧方开窗,以10-0无损伤缝线行端侧吻合桥接静脉,神经束部分切断植入组开窗后,切断供体神经主干的部分神经束,植入静脉管腔内。对照组只显露胫神经及腓总神经,不切断。 3.分别在术后3天、7天、28天三个时间段,将大白兔深度麻醉后,取出腰膨大脊髓(以L4-L6为中心)。分别进行HE染色观察脊髓神经元的形态和数量的变化,免疫组化和免疫荧光检测脊髓神经元功能性变化,电镜观察神经元超微结构的变化。 结果：1.神经外膜开窗组四肢活动正常,局部红肿,随神经支配恢复后,肢体肿胀逐渐减轻,神经束部分切断植入组可观察到大白兔右下肢活动不利,有5只大白兔出现轻度足底溃疡。 2.HE染色结果神经外膜开窗组及空白对照组无明显变化,而神经束部分切断植入组脊髓前角神经元有轻微改变。 3.免疫组化和免疫荧光检测结果神经束部分切断植入组术后3天,BDNF在运动神经元内表达开始增加,术后7天时,BDNF的表达继续增加,之后BDNF表达逐渐升高,直至术后1个月。NGF的表达通过免疫荧光检测看在术后7天还未见明显上升,术后1个月有表达。其余两组,在术后各个时间段,均未见BDNF及NGF在神经元内有表达。 4.电镜观察神经外膜开窗组术后3天仅看细胞质内出现空泡,没有观察到细胞核；术后7天见到线粒体有些形态,核膜消失,溶酶体出现,并且出现大量空泡；术后1个月细胞核再次出现,线粒体形态恢复。神经束部分切断植入组术后3天,总体还好,有核仁,核膜完整,但细胞质开始出现细胞器空泡,证明细胞器水肿,结构残存但不清楚；术后7天,病变高峰期,凋亡出现,超微结构病变也明显,核膜不明显,空泡加重,核糖体大量增加,说明溶酶体增多,开始坏死结构。术后1个月,神经元开始恢复,出现细胞核,核膜也能够观察到,空泡减少。 结论：1.预制神经造成的周围神经损伤后相应节段脊髓前角运动神经元发生改变,损伤后神经元虽然有所减少但变化较轻微,并且在四周后,开始转入修复阶段。 2.预制神经若单纯对周围神经进行开窗,那么对脊髓运动神经元的损伤,无论是从形态学上,还是从功能上均没有造成明显影响。 3.预制神经若对周围神经开窗后并局部切断少部分神经束植入,那么对脊髓运动神经元虽然从形态学上,没有造成明显改变,但是功能上会造成一定程度的影响。
【关键词】：预制神经 周围神经损伤 运动神经元 超微结构 端侧吻合
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R651.3
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语10-11
• 前言11-13
• 研究现状、成果11-12
• 研究目的和方法12-13
• 1. 对象和方法13-17
• 1.1 实验材料13-14
• 1.1.1 实验动物13
• 1.1.2 实验药物和试剂13
• 1.1.3 实验器械和仪器13-14
• 1.2 实验方法14-15
• 1.2.1 动物模型的建立和分组14-15
• 1.2.2 标本的采集和处理15
• 1.3 病理检测指标15-17
• 1.3.1 HE染色观察运动神经元形态和数量变化15-16
• 1.3.2 免疫组化和免疫荧光检测16-17
• 1.3.3 透射电镜观察17
• 1.4 定量分析与统计学处理17
• 2. 结果17-32
• 2.1 大体观察17-18
• 2.2 术中所见18
• 2.3 HE染色结果观察18-21
• 2.4 免疫组化和免疫荧光检测21-24
• 2.5 电镜24-32
• 3. 讨论32-39
• 4. 存在的不足39-40
• 结论40-41
• 参考文献41-45
• 发表论文和参加科研情况说明45-46
• 综述 使用人工神经治疗周围神经缺损的进展46-59
• 综述参考文献54-59
• 致谢59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：499870