布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspB的原核表达及布鲁氏菌免疫逃逸分析
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【摘要】:目的克隆并表达布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspB并推测其免疫逃逸机制。方法以羊种布鲁氏菌16M基因组为模板,利用PCR扩增布鲁氏菌分泌蛋白BspB(BAB1-0712)基因,连接pMD19-T载体后测序,将测序正确的基因片段经双酶切后克隆至pET-30a载体中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果成功克隆了BspB基因,片段大小为564bp;SDS-PAGE检测,BspB蛋白分子质量单位约为27.5ku;Western blot分析显示,BspB蛋白均可被布鲁氏菌阳性血清识别。该蛋白测序后与先天性免疫分子IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4、SIGIRR比对,具有一定的同源性。结论重组蛋白BspB具有免疫反应原性,可作为候选诊断抗原;由于其序列与IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4及SIGIRR有一定同源性,BspB可能在布鲁氏菌感染宿主过程中发挥免疫逃逸的作用。
【作者单位】: 石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室;石河子大学动物科技学院;铜仁学院生物与农林工程学院;
【关键词】: 布鲁氏菌 效应蛋白 Ⅳ型分泌系统 原核表达 免疫逃逸
【基金】:杰出青年科技人才培育计划项目(No.2013ZRKXJQ06) 高层次人才科研启动资金专项(No.RCZX201228) 博士科研启动基金项目(No.trxyDH1504)
【分类号】:R378.5
【正文快照】: [Journal of Pathogen Biology.2015Sep;10(9):778-781,815.]Prokaryotic expression of BspB protein of the type IV secretion system of Brucella and analysis of im-mune evasion by Brucella于宿主细胞(如巨噬细胞、树突细胞、滋养层细胞、上皮细胞等)内,并且能够在宿
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本文编号:503585
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