SM22α抑制Ras激活的机制及黄芩苷的靶向干预

发布时间：2017-07-01 00:07

  本文关键词：SM22α抑制Ras激活的机制及黄芩苷的靶向干预，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell, VSMC）的表型转化是高血压、动脉粥样硬化、血管再狭窄等血管重塑性疾病发生、发展的关键因素。血小板源性生长因子（platelet-derived growth factor, PDGF）是VSMC的强效促丝裂原和趋化剂。黄芩苷（baicalin）是一种从中草药中提取的草本衍生的黄酮类化合物。已有研究发现，黄芩苷具有抑制VSMC增殖的作用。平滑肌22alpha (smooth muscle22alpha, SM22α)是收缩型VSMC的分化标志基因，，具有抗增殖功能。Ras蛋白是原癌基因ras表达的一种小G蛋白，参与细胞生长、分化、细胞骨架、蛋白质分泌和运输等过程的调节。我们前期发现，黄芩苷抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖，本研究进一步探讨其作用机制。 方法与结果： 1黄芩苷抑制PDGF-BB诱导的VSMC表型转化 PDGF-BB（20ng/ml）刺激VSMC24h后，Western blot结果显示，PDGF-BB明显促进VSMC增殖标志物PCNA的表达，抑制VSMC分化标志物SM22α、caldesmon、calponin、SM α-actin的表达。 用黄芩苷预处理VSMC24h后，再用PDGF-BB刺激VSMC24h，Western blot结果显示，黄芩苷抑制PDGF-BB诱导的PCNA上调和分化基因SM22α、caldesmon、calponin、SM α-action下调。结果提示，黄芩苷抑制PDGF-BB诱导的VSMC表型转化。 2SM22α通过与Ras相互作用抑制PDGF-BB诱导的SOS1-Ras信号复合物形成 SOS1与Ras的相互作用是Ras活化的重要步骤。用PDGF-BB刺激平滑肌细胞2min后，进行免疫沉淀分析。结果发现PDGF-BB促使SOS1与Ras的相互作用，而过表达SM22α则竞争抑制SOS1与Ras的结合。结果提示，SM22α可能通过与Ras结合而阻止SOS1-Ras信号复合物的形成，进而抑制Ras活化。 3SM22α磷酸化突变体促进SOS1和Ras的相互作用 免疫沉淀分析结果显示，过表达SM22α非磷酸化突变体S181A抑制Ras与SOS1的结合，与野生型SM22α作用一致；而过表达SM22α强制磷酸化的S181D突变体，则促进Ras-SOS1复合物结合。这些结果佐证了上述发现。 4黄芩苷抑制球囊损伤诱导的ICAM-1和VCAM-1表达和内膜增生 免疫组织化学染色结果显示，球囊损伤14d后，与损伤组相比较，黄芩苷显著抑制球囊损伤诱导的ICAM-1和VCAM-1表达。 结论： 1黄芩苷抑制PDGF-BB诱导的VSMC由分化型向合成型转化。 2过表达SM22α抑制PDGF-BB诱导的Ras-SOS1信号复合物的形成。 3SM22α磷酸化突变体促进SOS1-Ras信号复合物的形成。 4黄芩苷抑制球囊损伤诱导的ICAM-1和VCAM-1的表达和内膜增生。
【关键词】：血管平滑肌细胞 黄芩苷 SM22α 小G蛋白
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329;R96
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-9
• 材料与方法9-13
• 结果13-15
• 附图15-19
• 讨论19-21
• 结论21
• 参考文献21-23
• 综述 金属基质蛋白酶在 VSMC 迁移、增殖和凋亡中的作用23-37
• 参考文献32-37
• 致谢37-38
• 个人简历38

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张秀真,吴泽志;细胞伪足形成与微丝骨架研究进展[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2005年04期

2 呼海娟;韩梅;孙荣华;刘彬;温进坤;;黄芩苷抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖和新生内膜肥厚[J];基础医学与临床;2010年12期

  本文关键词：SM22α抑制Ras激活的机制及黄芩苷的靶向干预，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：503927