尿毒清调节肾衰竭模型肾组织MMPs及其信号通路促进ECM降解的机制

发布时间：2017-07-01 12:17

  本文关键词：尿毒清调节肾衰竭模型肾组织MMPs及其信号通路促进ECM降解的机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[背景/目的]本文分为3部分。首先,我们综述了尿毒清(uremic clearance,UC)治疗慢性肾衰竭(chronic renal failure, CRF)的研究概况。尿毒清是中药复方制剂,具有健脾利湿、通腑降浊、活血化瘀等功效。在临床药效学方而,尿毒清治疗CRF的效果主要是指改善肾功能和减少CRF相关并发症；在药理研究方而,尿毒清治疗CRF的机制主要包括抑制TGF-β1表达,减轻足细胞损伤,抑制肾小管上皮细胞转分化,改善微炎症状态,抑制氧化应激,减轻胰岛索抵抗等。其次,我们总结了肾脏基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)调控和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解的分子机制及中药的干预作用。肾脏ECM降解减少是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)肾组织损伤的形态特征和病理基础。在肾小球或肾间质中,ECM降解的调控主要依赖于MMPs和金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases, TIMPs)构成的降解酶系统。其中,MMPs发挥着核心作用。MMPs的表达和活性受控于“基因转录、酶原激活、特异性抑制剂”等经典途径,并且,与转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β1/Smads信号通路密切相关。以尿毒清为代表的中药复方制剂及中药提取物可以干预ECM降解的多种途径,包括促进ECM成分降解、影响ECM降解酶表达、调节MMPs基因转录、抑制MMPs相关信号转导等。最后,作为本文的重点,我们阐明了尿毒清调节肾衰竭模型肾组织MMPs及其信号通路而促进ECM降解的机制。我们借助腺嘌呤灌胃并单侧输尿管结扎术(unilateral ureteral obstruction,UUO)的方法而建立衰竭模型,在与依那普利相对照的前提下,首先,观察尿毒清对模型鼠肾功能的改善作用；其次,阐明尿毒清对模型鼠ECM降解及MMPs/TIMPs降解酶系统的调控作用；最后,揭示尿毒清调节模型鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路而促进ECM降解的机制。 [方法]将26只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、尿毒清组、依那普利组。采用腺嘌呤灌胃并单侧输尿管结扎的方法而建立肾衰竭模型。造模成功后,尿毒清组、依那普利组大鼠经口灌胃分别给予尿毒清悬浊液(5g/kg/d)和依那普利悬浊液(0.02g/kg/d),并同时以蒸馏水干预正常组、模型组大鼠,共干预3周。术后每周末称量大鼠体重,并检测24h尿蛋白排泄量(urinary protein excretion,Upro)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acety1-β-D-glucosaminidase, NAG);术后第3周末,处死大鼠,抽取血液,摘除双肾并称重,观察并检测肾脏外观特征、血清生化指标、肾组织形态特征等,并且,检测肾组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TGF-β1、磷酸化Smad2/3(phosphorylated-Smad2/3,p-Smad2/3)、Smad7蛋白相对表达量。 [结果]模型鼠经尿毒清干预后,其一般情况、肾脏外观特征和血清生化指标,如血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿酸(uric acid, UA)、白蛋白(albumin,Alb)以及Upro、尿NAG酶和肾组织形态改变均得到不同程度的改善,其中,对于Scr、BUN、UA、A1b,其效果与依那普利相仿；对于胶原沉积,其效果优于依那普利。尿毒清上调模型鼠肾组织MMP-2、MMP-9蛋白表达,下调其抑制剂TIMP-1蛋白表达；并且,与依那普利相比,其对促进MMP-9蛋白表达上调、TIMP-1蛋白表达下调的作用更好；尿毒清下调模型鼠肾组织TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表达,上调Smad7蛋白表达；并且,与依那普利比较,尿毒清促进TGF-p1蛋白下调、Smad7蛋白上调的作用更好。 [结论]对于肾衰竭模型鼠,尿毒清具有改善肾功能的作用；尿毒清通过调控MMP-2. MMP-9.TIMP-1蛋白表达而促进ECM降解；尿毒清通过双向调节肾组织TGF-β1/Smads信号通路中关键信号分子—-TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达而促进ECM降解。
【关键词】：肾衰竭 尿毒清 细胞外基质 基质金属蛋白酶
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R277.5
【目录】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 第一部分 文献综述11-27
• 尿毒清治疗慢性肾衰竭的研究概况11-17
• 1. 尿毒清治疗慢性肾衰竭临床药效学的研究11-12
• 2. 尿毒清治疗慢性肾衰竭药理机制的研究12-15
• 参考文献15-17
• 肾脏MMPs调控和EMS降解的分子机制以及中药的干预作用17-27
• 1. 基质金属蛋白酶及其活性的调控机制17-19
• 2. 基质金属蛋白酶与细胞外基质降解19-20
• 3. 基质金属蛋白酶Smads信号调控途径20-21
• 4. 中药对细胞外基质降解的干预作用21-24
• 参考文献24-27
• 第二部分 实验研究27-43
• 尿毒清调节肾衰竭模型肾组织MMPs及其信号通路促进ECM降解的机制27-43
• 引言27-28
• 材料与方法28-31
• 结果31-38
• 讨论38-41
• 参考文献41-43
• 结语43-44
• 致谢44-45
• 攻读硕士学位期间在国内外发表的论文目录45-47
• 英文缩略词表47-48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：505901