丙型肝炎病毒多表位基因载体的构建与表达

发布时间：2017-07-02 01:00

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【摘要】：目的构建编码多个丙型肝炎病毒(HCV)抗原表位的真核表达载体,建立稳定转染的细胞株,并利用小鼠移植瘤模型初步评估疫苗在动物体内的免疫反应状况。方法合成含10条CTL细胞表位的M2基因,与含多条B细胞及T细胞表位的M1基因连接合成M1M2基因;将M2、M1M2基因分别与pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/M2及pcDNA3.1(+)/M1M2;将上述两种载体与pcDNA3.1(+)/M1分别转入SP2/0细胞中,并检测目的蛋白表达;用3种重组质粒分别免疫BALB/c小鼠移植瘤模型,初步评估疫苗引起的免疫反应。结果 3种真核表达载体在SP2/0细胞中均能得到稳定表达,免疫荷瘤小鼠后,小鼠瘤体的大小M1M2组M2组M1组空质粒对照组,实验组均能观察到肿瘤组织的坏死现象。结论成功构建了HCV多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/M1M2,用该表达载体免疫小鼠可引起较强的特异性免疫应答。
【作者单位】： 四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室;
【关键词】： 丙型肝炎病毒 多表位基因 核酸疫苗
【基金】：四川大学实验技术立项资助课题(No.0083304116008)
【分类号】：R392;R373.2
【正文快照】： 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染是慢性肝病的最主要病因之一。我国是丙肝的高发区,一般人群感染率平均为3.2%[1-3]。HCV感染较其他类型肝炎病毒感染的危害性大,感染早期难以产生有效的抗病毒免疫,肝炎易慢性化,与肝硬化、肝癌的发生关系密切。HCV感染的标准治疗手段

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本文编号：507999