酶解法清除猪皮α-Gal抗原的研究

发布时间：2017-07-02 02:02

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【摘要】：目的利用脆弱拟杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶清除猪皮细胞及基质的异种抗原(α-Gal抗原),降低猪皮基质敷料的免疫原性。方法 2月龄健康无皮肤疾患的猪皮皮片,经剖层裁切成不同的规格后,分别经碘酊和75%乙醇溶液浸泡消毒,随后用PBS清洗后进行酶解条件的摸索;采用免疫荧光法检测猪皮的α-Gal抗原,双抗夹心ELISA法检测残留酶,通过对酶解猪皮的残留酶和α-Gal抗原的检测进而优化、改进酶解条件和洗涤条件,以确立最佳酶解工艺。结果建立了有效的酶解方法和洗涤方法,酶解后猪皮的α-Gal抗原清除率90%,残留酶不能检出(间接ELISA法检测微量α-半乳糖苷酶的下限为1 ng/ml)。结论所建立的酶解工艺和洗涤工艺可有效清除猪皮细胞及基质的α-Gal抗原,建立了制备低免疫原性猪皮敷料的方法。
【作者单位】： 军事医学科学院野战输血研究所;
【关键词】： 猪皮 免疫原性 α-半乳糖苷酶 α-Gal抗原 残留酶
【基金】：国家科技重大专项资助项目(2013ZX09J13110B)
【分类号】：R392.4
【正文快照】： 创面修复是烧(创)伤领域一个永恒的主题,人们在创面修复方面进行了不懈的研究与探索。用于创面修复材料除自体皮以外,其他种类还包括异体皮、异种皮以及人工合成敷料。虽然异体皮和人工合成敷料在临床应用中能达到良好的修复效果,但其来源有限,价格昂贵,因此异种(猪)皮成为临

【参考文献】

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本文编号：508156