人促卵泡激素体外生物学活性测定方法的建立

发布时间：2017-07-03 23:02

  本文关键词：人促卵泡激素体外生物学活性测定方法的建立

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【摘要】：目的:建立人促卵泡激素(FSH)体外生物学活性检测方法,并对方法进行验证。方法:以人卵巢颗粒细胞KGN为基质细胞,用不同浓度的FSH与KGN细胞表面的FSH受体结合,刺激细胞产生不同浓度的孕酮,通过测定细胞培养上清中的孕酮含量来评价FSH的生物学活性,结果用国际标准品进行校正;对方法的专属性、线性与范围、回收率、精密度、耐用性进行验证;对市售FSH产品进行检测,并与传统动物体内活性检测结果进行比较。结果:KGN细胞对FSH有很好的剂量反应关系,方法专属性符合要求;线性范围为0.1~200 ng/m L,相关系数R2≥0.99;回收率为80%~120%;经3次重复测定,3批市售样品和3批自制样品的活性分别为(13.4±0.4)~(13.5±0.8)和(12.9±0.7)~(14.3±1.2)IU/μg,变异系数在15%之内;结果显示该方法有很好的耐用性。测定3批市售重组人FSH产品和1批尿源FSH国家标准品,其体外活性测定结果与传统动物体内活性测定结果一致。结论:建立并验证了一种利用KGN细胞体外测定FSH生物学活性的方法,有望代替传统的动物体内活性测定方法,可用于FSH的生物学活性评价和质量控制。
【作者单位】： 军事医学科学院生物工程研究所;北京泰德制药股份有限公司;
【关键词】： 人促卵泡激素 人卵巢颗粒细胞 体外细胞生物学活性 卵巢增重法 孕酮含量
【分类号】：R321
【正文快照】： FSH)是一种治疗女性不孕的重要药物,主要用于治疗女性无排卵性不孕症、控制性卵巢刺激和辅助生殖技术等。FSH是一个异源二聚体的糖蛋白激素,由垂体前叶产生,相对分子质量约30×103。FSH由一个α亚基和一个β亚基经非共价键连接[1],其中α亚基与其他糖蛋白激素如促甲状腺素(thy

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