人白细胞介素7在CHO细胞中的表达及活性鉴定

发布时间：2017-07-04 21:13

  本文关键词：人白细胞介素7在CHO细胞中的表达及活性鉴定

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【摘要】：目的:用CHO细胞表达人白细胞介素7(IL-7),并验证其促细胞增殖功能。方法:构建表达质粒pc DNA5/FRT-IL-7,用Lipo2000将辅助质粒p OG44和表达质粒共转染Flp-In-CHO细胞,潮霉素B筛选并单克隆化稳定表达目的蛋白的细胞;通过Western印迹、ELISA方法验证上清中的目的蛋白,并对其定量;用流式细胞仪检测该蛋白促外周血单核细胞增殖的能力。结果:获得了2株稳定表达IL-7的细胞,IL-7的表达量均为3 mg/(L·d);流式细胞术检测表明,所表达的IL-7的促外周血单核细胞增殖能力强于RD原核系统表达的IL-7。结论:获得了稳定表达人IL-7的CHO细胞系,且表达的蛋白具有促外周血单核细胞增殖的功能。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;
【关键词】： 人白细胞介素- CHO细胞 外周血单核细胞
【基金】：国家科技重大专项(2014ZX10004002-004-001)
【分类号】：R392
【正文快照】： 白细胞介素(interleukins,IL)是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,具有重要的免疫调节作用。白细胞介素7(IL-7)是由肠道上皮细胞,淋巴结的滤泡树突状细胞和网状纤维细胞,脾、骨髓和胸腺等基质细胞产生的一种多功能细胞因子[1-2]。IL-7通过CD127和CD132受体复合物激活

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7 李素，

本文编号：519356