骨髓源性血管内皮祖细胞体外分离、培养及分化为内皮细胞的研究

发布时间：2017-07-04 21:04

  本文关键词：骨髓源性血管内皮祖细胞体外分离、培养及分化为内皮细胞的研究

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【摘要】：目的探讨骨髓源性血管内皮祖细胞(EPCs)在体外分离、培养、诱导分化及鉴定的方法。方法抽取SD大鼠的骨髓细胞,离心法提取骨髓液中单个核细胞,用含有血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、表皮细胞生长因子(EGF)的培养液诱导培养EPCs,观察并记录EPCs的生长分化过程;对培养后的细胞进行免疫荧光染色,鉴定细胞表面标志物,同时,RT-PCR法检测EPCs特异性分子标志物。结果培养24 h后细胞开始贴壁,4 d后细胞呈集落样生长,细胞从集落中央向外周生长,至培养的第7天成片生长的细胞集落相互连接,10 d后细胞形态明显改变,呈现典型的"鹅卵石样"外观。贴壁细胞免疫荧光检测显示CD34、CD133、VEGFR-2、FGFR1均阳性,经RT-PCR法检测,EPCs表达的特异性分子标志物均为阳性。结论以梯度离心法获得骨髓单个核细胞经培养后,可扩增出具有典型特征的EPCs,呈贴壁增殖状态且具有分化能力,经体外诱导可分化为成熟的血管内皮细胞。
【作者单位】： 河北省邯郸市中心医院;
【关键词】： 骨髓 内皮祖细胞 细胞分离 诱导 血管内皮细胞
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是具有增殖、扩增并分化为成熟血管内皮细胞的一类多潜能细胞。近年来,EPCs在血管内皮功能受损和缺血梗阻性疾病中的治疗作用受到越来越多专家学者的重视,其相关的基础研究亦受到广泛关注。目前EPCs主要从骨髓、脐带血及外

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本文编号：519285