重组人鼠嵌合抗CD20单克隆抗体免疫原性检测方法的建立

发布时间：2017-07-08 04:06

  本文关键词：重组人鼠嵌合抗CD20单克隆抗体免疫原性检测方法的建立

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【摘要】：目的:建立一种灵敏、特异、操作简单的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中抗CD20单克隆抗体的免疫原性。方法:首先采用桥连ELISA法对抗药物抗体(ADA)进行定性筛选,以抗CD20单克隆抗体作为包被抗体,以生物素标记的抗CD20单克隆抗体作为检测抗体,二者共同结合血清中存在的ADA,以D450/560nm值超过临界值作为阳性判断标准;初筛为阳性的样本采用免疫清除法进一步确证,并同时进行免疫交叉试验考察ADA对供试品和原研对照品的免疫反应有无差异。结果:建立了检测ADA的筛选方法和确证方法,确定了检测的临界值和归一化因子,血清中抗药物抗体的检测灵敏度达3.5 ng/m L,批内/批间精密度介于3.1%~7.4%,准确度介于-1.2%~9.5%;食蟹猴连续给药后,部分个体产生特异性抗体,且抗体滴度随时间延长而增高。结论:建立的ADA筛选方法和确证方法可用于毒性试验的免疫原性检测;动物给药剂量对抗体的产生有较大影响,低剂量连续给药更易诱发特异性抗体产生。
【作者单位】： 北京理工大学生命学院;军事医学科学院微生物流行病研究所;军事医学科学院放射医学研究所国家蛋白质组学重点实验室北京蛋白质组研究中心;
【关键词】： 抗CD单克隆抗体 桥联ELISA 免疫原性
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 3.军事医学科学院放射医学研究所,国家蛋白质组学重点实验室,北京蛋白质组研究中心,北京102206CD20是B淋巴细胞表面特异性抗原之一,在淋巴细胞分化早期表达并且能激活淋巴细胞,导致淋巴细胞增殖分化。CD20分子在95%以上的B细胞性非霍奇金淋巴瘤(NHL)中均有表达,是治疗B细胞淋

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