表没食子儿茶素没食子酸酯对过氧化氢预处理的昆明小鼠1-细胞胚体外发育以及2-细胞胚内雌激素受体α分布的影响

发布时间：2017-07-08 04:10

  本文关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯对过氧化氢预处理的昆明小鼠1-细胞胚体外发育以及2-细胞胚内雌激素受体α分布的影响

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【摘要】：目的： 1、观察不同浓度H_2O_2短时间处理对昆明（KM）小鼠1-细胞胚体外发育的影响。 2、观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是否能逆转H_2O_2预处理导致的小鼠早胚体外发育阻滞。 3、检测EGCG培养后小鼠2-细胞胚中总ERα和磷酸化ERα（Ser167）分布和表达水平的变化，探讨EGCG促进小鼠早胚体外发育的机制。 方法： 1、取KM小鼠1-细胞胚，置于不同终浓度H_2O_2的M16培养液中培养25min后，分别移入M16或M16+EGCG培养液中培养，观察各组发育情况。 2、取KM小鼠1-细胞胚，分别置于M16和M16+EGCG培养液中，体外培养至2-细胞胚期（hCG后50h），用激光扫描共聚焦显微镜检测胚内ERα与磷酸化ERα(Ser167)的表达和定位情况。 结果： 1、较低浓度（1μM、10μM）H_2O_2处理1-细胞胚25min可以促进KM小鼠早胚体外发育；较高浓度（20μM、40μM）H_2O_2抑制早胚体外发育。 2、用10μg/mL EGCG可以逆转由20μM H_2O_2预处理导致的早胚发育阻滞，使4-细胞和桑葚胚发育率恢复空白对照水平，但无法提高囊胚发育率。 3、激光扫描共聚焦显微镜观察显示，10μg/mL EGCG培养KM小鼠2-细胞胚的胞质中磷酸化ERα (Ser167)水平升高。 结论： 在小鼠早胚1-细胞和2-细胞阶段维持适宜浓度的氧自由基可能具有重要意义。高浓度的氧自由基可对早胚发育产生不可逆的伤害，较低浓度的氧自由基可以提高早胚发育率。适宜浓度的EGCG可逆转高浓度H_2O_2引起的早胚发育阻滞，但无法提高囊胚发育率。所以推测EGCG可能是通过清除氧自由基维持正常的卵裂，，但是不能恢复由H_2O_2预处理引起的囊胚形成障碍。EGCG作用导致小鼠2-细胞胚磷酸化ERα(Ser167)水平升高，但是总ERα含量及定位不变，提示EGCG促进小鼠早胚体外发育的机制可能是通过对ERα转录后修饰途径，而不引起ERα蛋白表达水平的改变。
【关键词】：表没食子儿茶素没食子酸酯 过氧化氢 雌激素受体α 植入前胚 体外培养
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329
【目录】：

• 英文缩略词4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一部分9-19
• 材料和方法9-12
• 结果12-17
• 讨论17-19
• 第二部分19-28
• 材料和方法20-23
• 结果23-27
• 讨论27-28
• 小结28-29
• 参考文献29-32
• 致谢32-33
• 综述33-39
• 参考文献37-39

【参考文献】

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1 陈安安;汪炬;;肿瘤中雌激素信号转导通路的研究进展[J];中国病理生理杂志;2012年03期

本文编号：532968