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人类牙胚组织成牙潜能的研究

发布时间:2017-07-15 14:04

  本文关键词:人类牙胚组织成牙潜能的研究


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【摘要】:牙齿的发生及发育过程是间充质与上皮之间相互作用的结果。在间充质与上皮的相互作用过程中,存在着两种组织间的相互诱导。目前对小鼠的牙齿发育已有大量的研究,但关于人类牙胚各组织的诱导成牙潜能均尚未见文献报道。本课题致力于研究人类牙胚组织在不同时期成牙潜能的存在部位,并期望将具有诱导成牙潜能的组织运用于诱导成体干细胞成牙的研究中,最终实现牙齿的再生。 本实验分别对人类帽状期、钟状期牙胚组织的诱导成牙潜能进行分析。首先将人的帽状期牙胚间充质分别与非牙源性的小鼠第二腮弓上皮或人表皮干细胞进行重组,重组体不能形成牙齿结构,说明人的帽状期牙胚间充质不具有诱导非牙源性上皮牙向分化的潜能;将人帽状期牙胚上皮与来源于口腔的非牙源性间充质进行重组,重组体在裸鼠体内移植培养4周便能观察到牙齿形态的形成,同时对具有牙齿形态的组织进行牙向分化标记基因的检测,结果显示,重组体能够在特定的位置表达PITX2、PAX9,说明人帽状期牙胚上皮具有诱导非牙源性间充质牙向分化的潜能;将人钟状期牙胚间充质分别与非牙源性的小鼠第二腮弓上皮或人表皮干细胞进行重组,重组体能够形成明显的牙齿结构。对具有牙齿形态的组织进行牙向分化标记基因的检测,结果显示,重组体能够在上皮位置特异表达AMELOBLASTIN、AMELOGENIN、MMP20,说明人钟状期牙胚间充质具有诱导非牙源性上皮牙向分化的潜能;将人钟状期牙胚上皮与来源于口腔的非牙源性间充质进行重组,重组体无法形成牙齿结构,说明人钟状期牙胚上皮不具有诱导非牙源性间充质牙向分化的潜能;同时,对人钟状期牙胚间充质组织打散重聚后的成牙潜能进行研究,结果显示,人钟状期牙胚间充质细胞体外培养5天后与小鼠第二腮弓上皮重组能够成牙。 综上所述,本研究证明了人早期牙胚组织诱导成牙潜能是从帽状期的牙胚上皮转移至钟状期的间充质;人钟状期牙胚间充质打散后重聚仍具有诱导成牙潜能。这为今后利用人类牙胚组织进行牙齿再生实验提供了基础数据。
【关键词】:牙齿发育过程 牙齿再生 诱导成牙潜能 牙向分化
【学位授予单位】:福建师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R321.5
【目录】:
  • 中文摘要2-3
  • Abstract3-5
  • 中文文摘5-10
  • 绪论10-18
  • 1 哺乳动物的牙齿发育10-12
  • 1.1 牙齿发育过程中各组织结构的形态发生10-11
  • 1.2 小鼠牙齿的形态发生11-12
  • 1.3 人类牙齿的形态发生12
  • 2 牙齿发育的机制12-15
  • 2.1 牙胚发育过程中上皮和间充质的相互作用13-14
  • 2.2 牙齿发育的分子机制14-15
  • 3 牙齿再生技术15-17
  • 4 研究意义17-18
  • 第1章 材料与方法18-30
  • 1.1 材料18-22
  • 1.1.1 人类材料来源18
  • 1.1.2 实验动物18-19
  • 1.1.3 实验试剂及配置19-22
  • 1.2 方法22-30
  • 1.2.1 人类材料的获取22-24
  • 1.2.2 小鼠材料的获取24
  • 1.2.3 组织块的重组技术24-25
  • 1.2.4 移植块的收获及使用25-30
  • 第2章 实验结果30-48
  • 2.1 人的帽状期牙胚组织诱导成牙潜能的研究30-36
  • 2.1.1 人的帽状期牙胚间充质无法诱导非牙源性上皮牙向分化30-34
  • 2.1.2 人的帽状期牙胚上皮具有诱导非牙源性间充质牙向分化的潜能34-36
  • 2.2 人的钟状期牙胚组织诱导成牙潜能的研究36-42
  • 2.2.1 人的钟状期牙胚间充质能够诱导第二腮弓上皮牙向分化36-38
  • 2.2.2 人的钟状期牙胚间充质能够诱导人表皮干细胞牙向分化38-41
  • 2.2.3 人的钟状期牙胚上皮无法诱导非牙源性间充质牙向分化41-42
  • 2.3 人的钟状期牙胚间充质细胞诱导成牙潜能的研究42-48
  • 2.3.1 人的钟状期牙胚间充质打散重聚体系的建立42-45
  • 2.3.2 人的钟状期牙胚间充质打散成单个细胞后仍具有诱导小鼠第二腮弓上皮成牙的潜能45-47
  • 2.3.3 人的钟状期牙胚间充质打散成单个细胞后无法诱导人表皮干细胞牙向分化47-48
  • 第3章 分析与讨论48-54
  • 3.1 人的帽状期牙胚组织诱导成牙潜能的研究48-50
  • 3.2 人的钟状期牙胚组织诱导成牙潜能的研究50-52
  • 3.3 人的钟状期牙胚间充质细胞诱导成牙潜能的研究52-54
  • 第4章 结论54-56
  • 4.1 人的帽状期牙胚组织诱导成牙潜能的研究54
  • 4.2 人的钟状期牙胚组织诱导成牙潜能的研究54
  • 4.3 人的钟状期牙胚间充质细胞诱导成牙潜能的研究54-56
  • 附录156-58
  • 附录258-60
  • 参考文献60-66
  • 攻读学位期间承担的科研任务和主要成果66-68
  • 致谢68-70
  • 个人简历70-72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 Sibel Yildirim;Susan Y. Fu;Keith Kim;Chang Hun Lee;Sahng Gyoon Kim;Jeremy J. Mao;;Tooth regeneration: a revolution in stomatology and evolution in regenerative medicine[J];International Journal of Oral Science;2011年03期

2 ;Making a tooth:growth factors,transcription factors,and stem cells[J];Cell Research;2005年05期



本文编号:544204

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