慢病毒介导BTLA转染未成熟树突状细胞的研究

发布时间：2017-07-18 03:10

  本文关键词：慢病毒介导BTLA转染未成熟树突状细胞的研究

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【摘要】：目的探讨构建携带B和T淋巴细胞衰减因子(BTLA)基因的慢病毒载体转染未成熟树突状细胞(DC)的可行性。方法根据GeneBank公布的小鼠BTLA的mRNA序列构建ORF慢病毒表达质粒,合成BTLA基因的重组慢病毒载体。原代分离培养CL57/BL小鼠骨髓来源的未成熟DC,用包含BTLA基因的重组慢病毒载体以感染复数为15转染至未成熟DC。采用免疫荧光、反转录PCR检测BTLA基因的表达。结果成功构建有活性的慢病毒载体LPP-Mm126645-Lv203-400,慢病毒滴度为3.25×10~9TU/ml。以重组慢病毒LPP-Mm266454-Lv203400转染未成熟DC 96 h后在荧光倒置显微镜下可观察到被感染的阳性细胞有绿色荧光蛋白表达,反转录PCR检测到感染的DC中BTLA基因的表达量比未感染的DC的表达量高(P0.05),提示转染成功。结论构建携带BTLA基因的慢病毒载体可成功转染BTLA至小鼠骨髓来源的未成熟DC。
【作者单位】： 中山大学附属第三医院神经内科;
【关键词】： B和T淋巴细胞衰减因子 慢病毒 树突状细胞 基因转染
【基金】：国家自然科学基金(81271327) 广东省科技计划项目(2011B03I8O0015)
【分类号】：R329
【正文快照】： B和T淋巴细胞衰减因子(BTLA)是免疫球蛋白超家族的一员,是CD28家族被发现的第3个抑制性分子,与相应受体疱疹病毒侵入介质(HVEM)结合提供抗原特异性T淋巴细胞活化的第二信号,在免疫反应早期阶段发挥重要的协同抑制作用[1]。树突状细胞(DC)是体内最强的专职抗原提呈细胞(APC),在

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3 陈芳,朱旭昆,贺宇飞,王晶,阳诺,张桂梅,冯作化;可溶性BTLA真核表达载体的构建及其抗肿瘤作用[J];华中科技大学学报(医学版);2005年04期

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本文编号：555772