抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体的制备、纯化和生物学特性鉴定

发布时间：2017-07-18 21:14

  本文关键词：抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体的制备、纯化和生物学特性鉴定

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【摘要】：目的:制备特异性抗牙龈卟啉单胞菌(Pg)的鸡卵黄免疫球蛋白(Ig Y)并检测其生物学特性。方法:厌氧培养牙龈卟啉单胞菌,将甲醛灭活的菌体经翅膀下浅层肌肉免疫150日龄罗曼母鸡3次,每次间隔10 d。取鸡蛋用两步硫酸铵沉淀法提取Ig Y,BCA法测定蛋白质含量,ELLSA法检测纯化后Ig Y的特异性和抗体效价变化,并进行SDS-PAGE和Western blotting分析。观察抗Pg-Ig Y对红细胞凝集的抑制作用。结果:经3次免疫后,抗体滴度最高可达25 600,纯化后每个鸡蛋可得约70 mg Ig Y抗体;SDS-PAGE分析,纯化的Ig Y有1条主要蛋白带,相对分子质量(Mr)为180 k D,纯度为65%;Western blotting分析,该Ig Y抗体可识别抗原Pg。每孔3.125μg Pg-Ig Y可有效抑制Pg的红细胞凝集活性;1 mg/m L Pg-Ig Y可有效抑制Pg生长。结论:本研究得到的Ig Y特异性强,产量和纯度高。
【作者单位】： 安徽医科大学口腔医学院;安徽医科大学附属口腔医院牙周黏膜科安徽省口腔疾病研究中心实验室;安徽安科生物工程(集团)股份有限公司;安徽医科大学人兽共患病安徽省重点实验室;
【关键词】： 牙龈卟啉单胞菌 免疫球蛋白Y 卵黄抗体
【基金】：安徽省自然科学基金(1308085MH130,1408085MKL28) 安徽安科生物校企合作项目(K2015011)
【分类号】：R392
【正文快照】： 口腔医院牙周黏膜科安徽省口腔疾病研究中心实验室;2.安徽安科生物工程(集团)股份有限公司;3.安徽医科大学人兽共患病安徽省重点实验室)牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivals,Pg)是目前公认慢性牙周炎的主要致病菌,与牙周炎的发生发展密切相关[1],85%的病变位点可检测到Pg

【共引文献】

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3 王R，

本文编号：559795